[目的](1)考察制药级冷冻干燥法制备的胎盘胶囊与传统高温干燥法制备的胎盘胶囊中人胎盘泌乳素(hPL)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的含量。(2)考察物理消毒(80℃水浴1h)对胎盘组织的微生物限度的影响。(3)考察制药级冷冻干燥法制备的与传统高温干燥法制备的胎盘胶囊在0,3,6个月的储存时间下微生物限度以及水分含量的变化。(4)比较胎盘活性肽脂质体冻干粉复溶溶液与胎盘活性肽溶液的透皮效果。[方法](1)将合格的人胎盘进行清洗、匀浆、物理消毒等操作,再分别采用传统高温干燥法和制药级冷冻干燥法将胎盘组织干燥,磨粉,装入胶囊壳,完成胎盘胶囊的制备。(2)分别取匀浆后,水浴消毒后的胎盘组织,传统高温干燥法烘干以及制药级冷冻干燥法冻干的胎盘粉末分别接种于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基和麦凯康琼脂培养基进行微生物限度检查。(3)分别抽取储存时间为0,3,6个月的制药级冷冻干燥法制备的胎盘胶囊与传统高温干燥法制备的胎盘胶囊接种于胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基和麦凯康琼脂培养基进行微生物限度检查。(4)用酶联免疫法测定匀浆后,水浴消毒后的胎盘组织,传统高温法烘干的胎盘粉末以及冷冻干燥法冻干的胎盘粉末中人绒毛膜促性腺激素(hCG),人胎盘催乳素(hPL)的含量。(5)通过卡尔·费休法分别测定制药级冷冻干燥法制备的胎盘胶囊与传统高温干燥法制备的胎盘胶囊在储存时间为0,3,6个月时的水分含量。(6)将合格的人胎盘清洗去除筋膜,按照2mL/g的比例加入生理盐水匀浆,经物理消毒(80℃水浴1h)和121℃高温灭菌30 min后,再对其进行离心、过滤操作,得到胎盘活性肽提取液。(7)采用薄膜分散联合冻融-冻干法制备胎盘活性肽脂质体冻干粉,取胎盘活性肽溶液与胎盘活性肽脂质体冻干粉复溶的溶液分别上样简易透皮扩散仪,收集2、3、6、8、12 h的接收液,用Lowry法测量蛋白含量,以单位面积积累透过量为指标,评价二者的透皮效果。[结果](1)胎盘匀浆组织未物理消毒前微生物限度中的需氧菌总数为1434 cfu/g,物理消毒后低于20 cfu/g;大肠埃希菌未检出。(2)储存时间为0,3,6个月的制药级冷冻干燥法制备的胎盘胶囊与传统高温干燥法制备的胎盘胶囊的微生物限度皆低于20 cfu/g。(3)对胎盘组织进行物理消毒(80℃水浴1h)后,匀浆组织中hCG的含量由9403 mIU/g减少为4213.62 mIU/g,hPL的含量由113.93 mIU/g减少为21.3 mIU/g。(4)用传统高温干燥法烘干物理消毒后的胎盘组织所得到的胎盘粉末,hCG的含量为10734 mIU/g,hPL的含量为10.9 mIU/g;用制药级冷冻干燥法冻干物理消毒后的胎盘组织所得到的胎盘粉末,hCG的含量为37303.2 mIU/g,hPL的含量为107.6 mIU/g。(5)制药级冷冻干燥法制备的胎盘胶囊储存0,3,6个月的的水分含量分别为5.8%,7.8%,10.1%;传统法高温干燥法制备的胎盘胶囊储存0,3,6的的水分含量分别为5.6%,6.7%,8.3%。(6)胎盘活性肽提取液蛋白含量为1704.225 ug/mL。(7)胎盘活性肽溶液的单位面积积累透过量在2、3、6、8、12 h分别为10.070 ug/cm2,12.123 ug/cm2,12.763 ug/cm2,15.605 ug/cm2,17.816 ug/cm2;胎盘活性肽脂质体冻干粉复溶的溶液的单位面积积累透过量在2、3、6、8、12 h分别为10.447 ug/cm2,12.996 ug/cm2,14.447 ug/cm2,17.548 ug/cm2,23.609 ug/cm2。[结论](1)物理消毒这个步骤能有效杀灭胎盘组织中携带的大量有害微生物;(2)在制药级洁净车间制备的两种胎盘胶囊,储存6个月后,微生物限度仍然符合中国药典(2015版)中非无菌生物制品制剂的微生物限度标准。(3)胎盘中含有的hCG和hPL两种激素对温度敏感,且随着制备温度升高而减少含量;hCG和hPL两种激素在制药级冷冻干燥法制备的胎盘胶囊中的含量远高于传统高温干燥法制备的胎盘胶囊,制药级冷冻干燥法优于传统高温干燥法。(4)胎盘活性肽脂质体冻干粉复溶的溶液透皮效果优于胎盘活性肽溶液。