化疗是化学药物治疗的简称。化疗常导致一些不良反应,如恶心呕吐、肠道黏膜炎、骨髓抑制、脱发等。5-氟尿嘧啶（5-Fluorouracil,5-FU）是一种广谱性化疗药物,主要用来治疗消化道肿瘤,其副作用是容易产生肠道黏膜炎。肠道黏膜炎的发生会严重影响患者的治疗,而现如今并没有用于治疗或预防这一毒副作用的有效药物。因此,如果能够针对药食同源食材,筛选出具有治疗或干预这种不良反应功能的天然产物,将有效降低化疗的毒副作用,提高治疗效果。香菇具有提高免疫力、促进食欲等多种功能。香菇多糖是从香菇中提取出的活性大分子,已有研究证明其对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性肠炎小鼠具有良好的治疗作用。然而对于香菇多糖是否能够干预化疗药所致的肠道黏膜炎没有报道。因此我们推测,香菇多糖具有干预化疗所致的肠道黏膜炎的功能。目的:确认香菇多糖对于肠道黏膜炎干预有效,证明其作用机制是通过修复肠屏障损伤而实现的。本研究旨在为深入研究肠道黏膜炎的生物学特点以及香菇多糖的干预机制奠定基础。方法:利用水提醇沉法制备香菇多糖。然后,用硫酸苯酚法检测所提取的香菇粗多糖里多糖含量,Bradford分光光度法测定蛋白含量。将40只SPF级别BALB/c雄性小鼠分为5组,分别为正常组（NC）、模型组（MG）、香菇多糖低浓度恢复组（LLT）、香菇多糖高浓度恢复组（HLT）及益生菌恢复组（CBL）。通过观察小鼠体重、进食量、腹泻情况以及组织病理学状况,对动物模型构建效果以及香菇多糖的干预效果进行评价。为了检测香菇多糖对于小鼠肠道生物屏障的修复效果,使用PCR-DGGE技术和16s r DNA测序技术对小鼠肠道菌群进行检测,并利用生物信息学和统计学方法进行归纳研究,发掘其菌群变化规律。由于肠粘膜的紧密连接蛋白的表达量,直接反映了肠道机械屏障的损伤情况,故采用免疫荧光方法检测结肠和小肠中紧密连接蛋白ZO-1和Claudin 1的表达水平,使用免疫组织化学方法检测结肠和小肠中紧密连接蛋白Occludin的分布及表达量的情况,同时也采用Western blotting技术对ZO-1和Occludin的表达水平进行准确定量。为了检测小鼠肠屏障的通透性,采用ELISA方法检测了血清中LPS的含量。黏蛋白MUC2是肠道化学屏障的主要成分,本研究采用免疫组织化学方法和AB-PAS染色方法分别检测了MUC2的表达情况及其肠道杯状分泌细胞的数量。肠道免疫屏障不但能维持机体的免疫功能,也为修复其它肠屏障提供保障。本研究采用ELISA方法,检测了小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的含量。结果:成功建立了化疗性肠道黏膜炎小鼠模型。并证明香菇多糖能够减缓小鼠体重下降、提高进食量、减轻腹泻、缓解结肠缩短。病理学检测结果显示,模型组小肠和结肠组织结构均发生严重破坏,小肠肠绒毛萎缩、腺体残缺、出现炎细胞浸润,结肠出现上皮坏死、隐窝消失、腺腔扩张。而香菇多糖能够减少小肠肠绒毛萎缩、炎细胞出现,减轻结肠上皮坏死,腺腔扩张情况。菌群分析结果显示,模型组的拟杆菌门、Muribaculaceae等有益菌减少,变形菌门、弯曲杆菌门等有害菌增加,菌群结构与正常组差异较大,菌群出现失衡。而香菇多糖能够恢复有益菌数目,抑制有害菌。菌群结构与正常组更类似,维持了生物屏障的稳定。肠道紧密连接蛋白是肠道机械屏障的重要成分。紧密连接蛋白表达的结果显示,模型组紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin 1的表达量均降低;经香菇多糖和益生菌的干预能提高三种蛋白质的表达量,修复了肠道的机械屏障。并且三种蛋白在香菇多糖高浓度恢复组的表达量均高于香菇多糖低浓度恢复组。LPS的检测结果也显示,香菇多糖和益生菌均能降低其在血清中的含量,降低肠屏障通透性,增强肠屏障的完整性。对小鼠肠道化学屏障的分析结果显示,模型组黏蛋白MUC2的表达量降低、杯状细胞数目减少,香菇多糖和益生菌均能提高它们的表达量,因此增强了机体的化学屏障,且香菇多糖恢复情况表现出剂量效应。免疫学分析结果显示,模型组中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6上升,抗炎因子IL-10下降;而通过香菇多糖和益生菌干预治疗,能够降低促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达,升高抗炎因子IL-10的水平,并呈现剂量效应。结论:1.香菇多糖对化疗所致的小鼠肠道黏膜炎模型具有干预作用。2.香菇多糖能够修复模型小鼠肠道的生物屏障、机械屏障、化学屏障和免疫屏障。3.香菇多糖干预小鼠肠道黏膜炎的作用机制可能是通过维持肠道菌群稳态、修复肠屏障、调节免疫功能、降低了肠道炎症反应。