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西洋参(Panax quinquefolius L.)又称西洋人参、花旗参、美国人参,为五加科人参属多年生药用植物。原产于美国和加拿大。20世纪70年代,西洋参在我国引种成功,成为我国重要人参品种之一。现代药理学证明西洋参具有强心、健胃、滋补、镇静、提高记忆力、保护肝脏、抗肿瘤、抗衰老等医疗和保健功能。其主要有效成份为人参皂苷。人参皂苷因其具有巨大的药用价值而成为国内外学者关注的热点。本实验以西洋参发状根为材料,在1/2MS液体培养基质中进行悬浮培养,筛选出水杨酸(SA)添加的最佳添加浓度、添加时间和作用时间。结果表明,在培养第20d添加浓度为0.001mg/L的水杨酸,作用时间为5d时,发状根的生物量增长为13.47倍,人参皂苷含量是对照组的1.2倍。实验跟踪检测了添加水杨酸后,西洋参发状根中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)活力在72h内的变化。结果表明,在加入水杨酸的第24h,过氧化物酶活力达到最高,是对照组的1.62倍;过氧化氢酶活力24h内逐渐升高,24h时达到最大值,是对照组的1.2倍,随后迅速下降;多酚氧化酶活力在加入SA后的20h内稳步提高。通过实时荧光定量PCR技术的SYBR green I荧光染料法测定了添加诱导子后72h内与人参皂苷合成的关键酶基因表达量的变化。结果表明,SQS、SQE、DS、β-AS、OSC基因表达量在18-22h内显著升高,CAS基因转录水平无明显变化,从而使得人参皂苷合成上调。这说明,添加诱导子能够促进发状根细胞中代谢活动的强度,有利于次级代谢产物大量合成。本实验探讨了诱导子作用下人参皂苷生物合成基因转录水平上表达量的变化,为进一步揭示相关基因的作用,深入研究探索人参皂苷的生物合成途径奠定了重要的理论基础,也为了利用西洋参发状根大规模生产人参皂苷提供理论依据和技术支持。