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背景：胃癌是一种常见疾病，多数患者被诊断时已属晚期，错失手术的机会，导致胃癌患者生存期短，生活质量差。近年来，β-catenin被发现是一种癌症相关蛋白，被证明在多种肿瘤细胞中高表达。β-catenin除与癌细胞增殖、凋亡、侵袭转移相关，还与肿瘤的化疗敏感相关。但是目前对于β-catenin与肿瘤之间关系的研究多数是在肠癌、乳腺、肝癌等中进行，对于胃癌细胞的研究尚少。本研究希望通过构建β-catenin-RNAi干扰慢病毒感染胃癌AGS、MGC803细胞株，下调胞内β-catenin的表达来研究此蛋白对胃癌细胞生物学行为的影响。目的：探讨通过沉默胃癌AGS、MGC803细胞株细胞中β-catenin蛋白的表达，观察β-catenin的表达量下调对此两株胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭力以及5-Fu敏感性的影响，并初步探讨其分子机制，为胃癌的诊治提供新思路。方法：1.制作慢病毒载体β-catenin-RNAi-433-LV(β-catenin-RNAi慢病毒液)及β-catenin-negative-LV (空载体慢病毒液)，分别转染胃癌AGS、MGC803细胞株。实验分组：实验组（感染β-catenin-RNAi慢病毒的AGS-RNAi-433、MGC803-RNAi-433）、阴性对照组（感染空载慢病毒的AGS-Neg、MGC803-Neg）、空白对照组（未处理的AGS、MGC803）。采用qRT-PCR及Western blot方法分别从mRNA及蛋白水平检测各组细胞β-catenin在胞内表达情况；2.MTT法分别检测各组细胞对5-氟尿嘧啶（5-Fu）敏感性的差异；3.采用Transwell小室法检测各组细胞体外侵袭、迁移能力的差异；4.流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡的差异；5.Western blot检测各组细胞β-catenin下游靶基因编码蛋白和5-Fu代谢酶的差异。结果：1.慢病毒成功感染胃癌细胞，得到稳定转染细胞株。qRT-PCR及Western blot检测实验组细胞在mRNA和蛋白水平上较对应阴性对照组均出现显著下调(P＜0.05)。而阴性对照组细胞qRT-PCR及Western blot检测胞内β-catenin表达与对应空白对照组无明显差异(P＞0.05)；2.MTT结果显示：实验组胃癌细胞对5-Fu的敏感性较对应阴性对照组均出现了显著性提高(P＜0.05)，而阴性对照组细胞对5-Fu的敏感性较对应空白对照组无明显差异(P＞0.05)；3.Transwell结果显示：实验组细胞侵袭、迁移能力较对应阴性对照组均减弱，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。阴性对照组细胞较空白对照细胞侵袭、迁移能力无明显差异(P＞0.05)；4.流式结果显示：实验组细胞的细胞周期分布发生改变，G1期细胞数增多，S期细胞数减少，S期/G1期细胞比值较对应阴性对照组出现下降(P＜0.05)，而阴性对照组细胞周期分布与空白对照组相比无明显变化。同时实验组细胞的凋亡率较对应阴性对照组出现统计学差异的增加(P＜0.05)，而阴性对照组与空白对照组相比无变化(P＞0.05)；5.Western blot结果显示：实验组细胞在细胞生物学行为相关蛋白方面有明显改变。其中实验组细胞cyclin D1、c-Myc、Bcl-2、MMP-7、TS的表达随β-catenin下调出现下调(P＜0.05)，而Bax的表达随β-catenin下调却出现上调(P＜0.05)，DPD的表达则随β-catenin下调无变化(P＞0.05)。结论：1.在胃癌细胞中，沉默β-catenin表达能够延缓细胞增殖、促进细胞凋亡、削弱细胞侵袭力、增加细胞对5-Fu的敏感性。2.在胃癌细胞中，β-catenin表达下调后细胞常见生物学行为相关蛋白表达量出现相应改变，主要表现为：cyclin D1、c-Myc、Bcl-2、MMP-7、TS的表达随β-catenin下调出现下调；Bax的表达随β-catenin下调却出现上调；DPD的表达则随β-catenin下调无变化。3.推测在胃癌细胞中β-catenin能够通过下调周期相关蛋白cyclin D1和c-Myc的表达来延缓细胞周期的进程；通过上调Bax及下调Bcl-2的表达来促进胃癌细胞凋亡；通过干扰MMP-7的表达抑制胃癌细胞体外侵袭；通过下调5-Fu靶酶TS的表达量来增强胃癌细胞对5-Fu的敏感性。