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本实验参照SRV9株全基因序列，选取N基因组保守区序列设计一对引物和一条，raqman探针。通过与狂犬病病毒7个基因型代表毒株N基因保守区序列进行比较，可以得出与基因I型的代表毒株具有高度的同源性，在优化反应条件的基础上，本实验成功地建立了可以特异的针对RV基因I型两步法荧光定量PCR检测方法。同时用已知病毒滴度的狂犬病病毒BHK-21细胞毒提取总RNA，转录合成cDNA，10倍稀释后建立了标准品，该标准品可以用于准确定量临床样品中狂犬病病毒滴度，以标准品验证建立的荧光定量RT-PCR检测方法的灵敏性可达到0.06个TCID50。建立的荧光定量RT-PCR方法对134份临床样品进行检测并同时进行免疫荧光和普通RT-PCR。结果表明，荧光定量RT-PCR方法与免疫荧光的符合率为100％，而且比普通RT-PCR敏感性高，证明建立的荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、高通量等优点。如果能应用在狂犬病病毒的检测上必将会成为RV早期监测和流行病学研究的有力工具。