血小板膜包覆共载Ce6和DTX的树状大分子纳米制剂的构建及其抗肿瘤作用研究

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由于复杂的血流成分、肿瘤微环境和肿瘤异质性,传统的纳米制剂对肿瘤的杀灭作用有限,主要体现在给药效率低和肿瘤渗透能力较差。为了应对这些挑战,我们构建了一种新型血小板膜涂层纳米颗粒(PCDD NPs),用于肿瘤的化疗/光动联合治疗。血小板膜赋予PCDD纳米颗粒良好的长循环作用和肿瘤靶向的能力,到达肿瘤部位,在近红外光(NIR)照射下,二氢卟吩e6(Ce6)产生活性氧(ROS),促进血小板膜破裂释放出CDD纳米粒,实现电荷反转和粒径变小,有利于肿瘤细胞对CDD纳米粒的内吞及药物的深层渗透。首先,通过酰胺反应将羧基化多烯紫杉醇与三代聚赖氨酸树状大分子(DGL-G3)的氨基进行共价连接,通过物理作用将Ce6载入DGL-G3疏水性的空腔中,得到共载Ce6和多烯紫杉醇(DTX)的Ce6/DGL-DTX纳米粒(CDD NPs)。然后将CDD纳米粒和血小板膜(PM)混合溶液过膜挤压得血小板膜包覆的纳米粒PM@Ce6/DGL-DTX(PCDD)。CDD纳米粒和PCDD纳米粒均为球形,PCDD纳米粒粒径约为252.9 nm,电位为-20.8mV,而CDD纳米粒粒径为79.38nm,电位为+14.9mV,不同浓度的PCDD纳米粒的溶血率均小于5%,证明其具有良好生物相容性。细胞摄取阻断实验表明PCDD纳米粒表面留存有P-选择素蛋白,与B16F10细胞表面的CD44受体特异性的结合,实现主动靶向。细胞毒和细胞凋亡实验显示出PCDD纳米粒具有最强的肿瘤细胞杀伤能力。抗原发瘤和远端瘤实验也表明PCDD纳米粒最强的抗肿瘤效果,由于纳米粒中Ce6可诱导免疫原性细胞死亡(ICD),产生损伤相关分子模式(DAMP),可增强抗肿瘤免疫反应,促进树突状细胞(DC)细胞的成熟,肿瘤和脾脏中杀伤性T细胞(CTLs)和辅助性T细胞(Ths)的增加。再者,纳米粒还可以抑制肿瘤细胞的肺转移。综上,本文制备的血小板膜仿生纳米粒集长循环、主动靶向和肿瘤深层渗透于一体,可在细胞水平和动物水平实现肿瘤的化疗-光动-免疫治疗,增强抗肿瘤疗效。
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