局部亚低温对大鼠脑出血后血脑屏障的影响

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目的:脑出血是一种致残率和死亡率极高的脑卒中类型,目前尚无有效的治疗措施。局部亚低温是一种运用物理降温方法将病人治疗区体温降到预期水平,从而达到治疗疾病目的的一种临床方法。它比全身亚低温更为安全,本实验将研究局部亚低温对实验性脑出血不同时间点脑损伤的作用。  方法:购买230只雄性Wistar大鼠,利用胶原酶Ⅶ制造大鼠脑出血模型。造模后随机将大鼠分为局部亚低温组和常温组,局部亚低温组利用贴敷式局部亚低温治疗仪对大鼠出血侧脑半球进行局部降温,常温组大鼠体温保持在正常范围。大鼠脑出血后1小时,6小时和12小时开始局部亚低温治疗,并比较各局部亚低温治疗组之间及局部亚低温组和常温组之间大鼠脑出血后行为学的变化。大鼠脑出血1小时后开始持续4小时的局部亚低温治疗,与常温治疗组一起子出血后第一天和第三天处死。利用依文思蓝法评价血脑屏障通透性;利用westernblot、实时定量PCR评价紧密连接蛋白(claudin-5,occludin)的蛋白和mRNA水平变化。利用免疫组化检测炎症因子(IL-1β,TNFα)表达的改变。使用方差分析对行为学评分、血脑屏障通透性、炎症因子的阳性细胞数、紧密连接蛋白的mRNA和蛋白水平等指标进行比较(p<0.05为有差异,p<0.01为有显著差异,p<0.001为有极显著差异)。  结果:早期局部亚低温(脑出血后1小时开始)治疗实验性脑出血后NSS行为学评分时早期局部亚低温在脑出血后第三天明显减轻了行为损伤(p=0.014),在其余时间点和晚期亚低温组及常温组相比无统计学差异(p>0.05)。与常温组相比,早期局部亚低温治疗组在出血后第1天和第3天均能减少透过血脑屏障的依文思蓝染料的含量,增加紧密连接蛋白mRNA和蛋白的表达水平(p<0.05)。  结论:在大鼠脑出血模型中,早期局部亚低温并未加重出血和行为损伤。此外局部亚低温对于保护血脑屏障的完整性是一种有效的治疗方法,它可以通过抑制炎症因子、增加紧密连接蛋白的表达来发挥保护作用。
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