重金属(Hg2+、Pb2+、Cr6+)对厚颌鲂幼鱼生物毒性效应的研究

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重金属具有长期性和不可逆性等特点,且对水生生物的危害较大,为水体中常见的污染物,为充分了解重金属对水生生物的毒性效应,本试验以厚颌鲂(Megalobrama pellegrini)为试验对象,研究了重金属污染物Hg2+、Pb2+、Cr6+对厚颌鲂幼鱼的单一毒性效应和联合毒性效应,从而为食品安全和保护水生生物生物资源及水域环境提供一定的理论依据,同时为水环境监测奠定一定理论基础。主要研究结果如下1、单一急性毒性试验采用静水试验法,设置6个浓度梯度组和1个空白对照组,每组设置3个平行,将厚颌鲂幼鱼暴露在重金属汞、铅、铬试验液中,观察并记录鱼的反应和24h、48h、72h、96h的死亡率,从而计算出Hg2+、Pb2+、Cr6+24h、48h、72h、96h的半致死浓度及安全浓度。结果表明,Hg2+、Pb2+、Cr6+的安全浓度分别为:0.0117mg/L、15.5938mg/L、3.1474mg/L,Hg2+对厚颌鲂幼鱼表现为高毒,Pb2+、Cr6+都为低毒,三种重金属离子对厚颌鲂幼鱼的毒性由强至弱分别为Hg2+>Cr6+>Pb2+。2、联合急性毒性试验采用静水试验法,以三种重金属离子96hLC50为一个毒性单位,混合试验溶液的浓度设为3.2、1.8、1.0、0.56、0.32五个毒性单位梯度组,按毒性单位1:1(1:1:1)计算出各重金属离子的浓度,同时设置一个空白对照组,每组设置3个平行,观察并记录暴露在混合溶液中的厚颌鲂24h、48h、72h、96h的死亡率,求出各混合液中重金属离子的24h、48h、72h、96h的LC50,并根据联合毒性评价方法评价重金属对厚颌鲂幼鱼的联合毒性。结果表明在24h、48h、72h、96h时,Hg2++Pb2+、Pb2++Cr6+、Hg2++Pb2++Cr6+的相加指数AI均小于0,为拮抗作用;Hg2++Cr6+的相加指数AI均大于0,为协同作用。3、Hg2+、Pb2+、Cr6+对厚颌鲂幼鱼组织酶活性的影响根据Hg2+、Pb2+、Cr6+及Hg2++Pb2++Cr6+联合的96hLC50,分别设置三个浓度梯度组,为各自96hLC50的5%、10%、15%,设一个空白对照组,每组设置3个平行,采用半静水试验法,共处理28d,分别于7d、14d、21d、28d采集样本测定酶活性。结果表明Hg2+、Pb2+、Cr6+及Hg2++Pb2++Cr6+联合对厚颌鲂脑组织AChE活性均有抑制作用,这种抑制作用随着时间的延长和处理浓度的不断升高而增强,到28d时,抑制率均达到最大值,各处理组的酶活性均低于对照组,且差异显著(P<0.05)。三种金属及其联合对厚颌鲂脑组织AChE活性抑制作用大小为Hg2+>Cr6+>联合>Pb2+。Hg2+、Pb2+、Cr6+及Hg2++Pb2++Cr6+联合均能降低厚颌鲂肌肉、肝胰脏、鳃的GOT、GPT的活性,且与对照组差异显著(P<0.05),具有显著的剂量时间效应。在相同作用时间及同等毒力下,Hg2+、Pb2+、Cr6+对肝胰脏及鳃的GOT活性抑制作用大于对肌肉的抑制作用,Hg2++Pb2++Cr6+联合对肌肉、肝胰脏及鳃的GOT活性抑制作用相近;Hg2+、Pb2+、Cr6+及Hg2++Pb2++Cr6+联合对肝胰脏及鳃的GPT活性抑制作用小于对肌肉的抑制作用。Hg2+、Cr6+、Pb2+及Hg2++Pb2++Cr6+联合对厚颌鲂组织GPT的抑制作用相近,而对GOT活性的抑制作用则是Hg2+Cr6+大于Pb2+、Hg2++Pb2++Cr6+联合。4、Hg2+、Pb2+、Cr6+对厚颌鲂幼鱼肝胰脏DNA损伤的影响根据Hg2+、Pb2+、Cr6+及Hg2++Pb2++Cr6+联合的96hLC5o,分别设置三个浓度梯度组,为各自96hLC50的5%、10%、15%,设一个空白对照组,每组设置3个平行,采用半静水试验法,共处理28d,分别于7d、14d、21d、28d采集样本。Hg2+、Pb2+、Cr6+及Hg2++Pb2++Cr6+联合处理组的肝胰脏细胞均出现彗尾现象,随着时间的延长和浓度的升高,处理组的彗尾率及尾部DNA的含量(%)不断升高,与对照组差异显著(P<0.05)。在相同处理时间同等毒力下,Hg2+、Cr6+对肝胰脏DNA的损伤大于Pb2+、Hg2++Pb2++Cr6+联合。
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