研究背景:白细胞介素34是一种由多种细胞分泌的蛋白质。它广泛表达于大脑、心脏、肝脏、脾脏、肾脏和结肠等多种组织,主要分布于皮肤和中枢神经系统,参与巨噬细胞的增殖、分化和存活。此外,白细胞介素34还通过多配体蛋白聚糖-1依赖的机制诱导髓系细胞迁移,并通过增加黏着斑激酶和细胞外信号相关激酶1和2的磷酸化水平,参与诱导巨噬细胞的浓度依赖性的趋化过程。但这些研究主要集中在体外细胞实验方面,对于其在体内影响巨噬细胞迁移的作用仍然了解较少。慢性肝病最常见的病因之一就是非酒精性脂肪肝。非酒精性脂肪肝炎的发生发展与巨噬细胞有密切的关系。巨噬细胞是免疫系统的重要组成部分。从功能上巨噬细胞可以分为M1型促炎巨噬细胞和M2型抑炎巨噬细胞。最近的研究表明M2型巨噬细胞可以通过促进M1型巨噬细胞的凋亡对脂肪性肝炎有保护作用。有报道称,白细胞介素34可通过激活PI3K/Akt/mTOR途径将肝脏驻留巨噬细胞从M1型巨噬细胞转变为M2型巨噬细胞,因此,白细胞介素34可能可以用于脂肪肝的治疗。我们利用斑马鱼建立了特异性在肝脏中过表达il34基因的转基因品系,旨在人工诱导巨噬细胞在肝脏中富集,从而研究白细胞介素34在体内对巨噬细胞迁移的影响,并探索在肝脏中过表达白细胞介素34是否对非酒精性脂肪性肝炎有保护作用。1.目的本文的研究目的是在斑马鱼中构建特异性在肝脏中过表达il34的转基因品系,探讨异位表达的白细胞介素34对诱导体内巨噬细胞向肝脏迁移的作用,并为探索在肝脏中过表达白细胞介素34是否对非酒精性脂肪性肝炎有保护作用。2.方法我们构建了由组织特异性启动子驱动白细胞介素34过表达的质粒,通过显微注射的方法,特异性的在斑马鱼表皮细胞或肝细胞中过表达白细胞介素34,采用原位杂交技术和抗体染色检测il34基因的表达和巨噬细胞或中性粒细胞的数量。同时,用共聚焦显微镜实时图像技术观察转基因斑马鱼幼鱼巨噬细胞的迁移。最后,利用油红O染色对过度喂养的转基因斑马鱼幼鱼进行染色,判断白细胞介素34在肝脏中的过表达是否对脂肪肝有保护作用。3.结果我们发现,在胚胎期斑马鱼表皮细胞或肝细胞中过表达白细胞介素34,可以人工诱导巨噬细胞（而非中性粒细胞）在皮肤或肝脏中富集。活体显像显示肝脏巨噬细胞的富集是由于白细胞介素34直接吸引巨噬细胞所致。油红O染色也初步证明在肝脏过表达白细胞介素34对脂肪肝可能有保护作用。4.结论在肝脏异位表达的白细胞介素34能诱导巨噬细胞在体内向肝脏迁移并对脂肪肝有保护作用。