目的:通过实验探索海参多糖(HGAG)单独应用以及与放射联合应用对人肺腺癌A549细胞系的增殖抑制以及促进凋亡作用,研究海参多糖能否对放射产生辅助抗肿瘤作用,并讨论其可能的作用机制,用实验数据为肺癌的临床治疗的潜在研究方向提供理论基础。方法:用培养液培养人肺腺癌A549细胞,待细胞生长至合适程度,采用CCK-8实验法进行预实验,通过设置一系列的海参多糖浓度梯度和放射剂量梯度并进行检测,选出最适合实验的海参多糖浓度及放射剂量,并根据结果对实验细胞进行分组:对照组(正常培养细胞但无实验处理)、HGAG组(HGAG浓度为200μg/ml)、放射组(放射剂量4Gy)、联合组(200μg/ml的HGAG联合4Gy的放射剂量共同处理),对于各组进行相应检测和数据采集:(1)倒置相差显微镜查看各时间段内各组细胞微观结构改变;(2)CCK-8实验法测定各相应时间段不同处理组细胞的增殖抑制率;(3)Hochest 33258实验法对实验细胞进行染色并观察细胞变化;(4)AnnexinV-FITC/PI双染法联合流式细胞术检验凋亡;(5)蛋白免疫印迹实验法测定各个组细胞对四种凋亡蛋白Survivin、Bax、Bcl-2及caspase-3的表达情况。结果:(1)通过预实验,最终选定HGAG 200ug/ml、放射剂量4Gy、联合组(HGAG200ug/ml、放射剂量4Gy)进行实验;(2)镜下可见经HGAG和放射线处理后,培养液内细胞计数降低,细胞稀疏、密集性减低,液面可见少量漂浮细胞,联合组最为明显;(3)CCK-8法检测实验结果显示,HGAG可以促进放射线发挥阻碍细胞生长效应,具有放疗增敏作用,24小时、48小时以及72小时的增殖抑制率差异有统计学意义,24 h、48 h和72 h各时间段的联合组与放疗组相比,增殖抑制率差异均有统计学意义;(4)Hochest 33258染色实验示:HGAG组、放射组及联合组在镜下都能观察到核碎裂、核固缩现象,细胞呈现为染色浓密的状态,联合用药组最为明显且密集程度最低;(5)Annexin V-FITC/PI双染结合流式检测显示:三个实验组与对照组相比,以及联合组与放疗组相比,总凋亡率差异有统计学意义;(6)Western blot试验检测数据示:三个实验组与对照组比较,以及联合组与放疗组相比,蛋白Bax、caspase-3的表达水平提高,蛋白Bcl-2、Survivin的表达水平减低。结论:HGAG可有效抑制A549肺癌细胞的增殖并促进其凋亡,二者的联合抗肿瘤作用表现为协同性,推测其作用机制与caspase蛋白和Bax蛋白表达上调,以及Survivin蛋白、Bcl-2蛋白的表达下调有关。