论文部分内容阅读
目的研究蛋白激酶CK2α在甲状腺疾病组织中的表达情况,分析CK2α与甲状腺癌转移的关系,进一步探讨蛋白激酶CK2α在甲状腺癌转移过程中的作用机制。方法1、采用免疫组化SP法检测CK2α、E-cardherin、N-cardherin和Tenascin C(TNC)在76例良恶性甲状腺疾病组织标本中的表达情况,包括9例慢性淋巴细胞性甲状腺炎、9例甲状腺结节、11例甲状腺腺瘤,20例有或无淋巴结转移的甲状腺乳头状癌、7例甲状腺滤泡状癌、9例甲状腺未分化癌和11例甲状腺髓样癌,以及10对有或无转移的淋巴结组织。分析CK2α与E-cadherin、N-cadherin和TNC在甲状腺癌中的相关性以及它们与癌淋巴结转移的关系。2、应用RT-PCR和Western blotting技术分别检测蛋白激酶CK2α的m RNA和蛋白在甲状腺癌和癌旁组织中的表达,分析CK2α基因在癌和癌旁组织中表达的变化。3、体外培养人甲状腺乳头状癌细胞株KTC-1,实验分为空白对照组(未处理组)、DMSO溶剂组、TBB组(TBB终浓度分别为25μmol/L、75μmol/L)。采用Western blotting方法检测蛋白激酶CK2α的蛋白表达情况,用细胞划痕实验检测细胞的迁徙情况。结果1、与甲状腺良性疾病(慢性淋巴细胞性甲状腺炎、结节性甲状腺肿和腺瘤)相比,CK2α的表达在甲状腺癌(乳头状癌、滤泡癌、未分化癌和髓样癌)组织中的表达明显升高(p<0.01);同时,E-cadherin表达降低(p<0.01),而N-cadherin表达升高(p<0.01)。进一步分析表明,蛋白激酶CK2α在甲状腺乳头状癌组织中的高表达与淋巴结癌转移、甲状腺癌临床分期显著相关;也与E-cadherin低表达(rho=-0.75,p<0.01)、N-cadherin高表达(rho=0.757,p<0.01)即上皮间质转化(EMT)相关,还和TNC的高表达明显有关(p<0.01)。2、RT-PCR和Western blotting结果表明,与癌旁组织相比,CK2α在甲状腺乳头状癌癌组织中的表达在m RNA和蛋白水平均显著升高(p<0.05)。3、与DMSO溶剂组相比,以不同浓度TBB组处理的KTC-1细胞,CK2α的表达显著降低,并与TBB剂量相关;同时TBB处理组的KTC-1细胞的迁移速度显著降低(p<0.01),但TBB两个浓度的处理组之间无明显差异。结论1、甲状腺癌淋巴结转移可能与CK2α高表达、并诱导了EMT的发生和提高Tenascin C的表达有关。2、TBB对人甲状腺乳头状癌细胞株KTC-1迁徙具有显著抑制作用,其机制可能与降低CK2α基因表达有关。3、本研究提示高表达的CK2α可能成为预示甲状腺癌淋巴结癌转移预后不良的一个指标。