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宁夏枸杞为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实,是一种驰名中外的名贵中药材和保健品。现代医学研究发现宁夏枸杞的药用机理主要有:免疫促进、抗氧化、抗辐射、抗肿瘤、保护肝细胞、抗衰老和促进性功能等作用。目前对宁夏枸杞黄酮还未见深入研究,很大程度上影响了其利用价值。因此本文主要对枸杞黄酮的含量测定、提取工艺、分离纯化及抗氧化性能进行了系统的研究,以期为开发利用枸杞及其有效成分提供一定的理论依据。研究结果如下:
(1)建立了枸杞黄酮含量的测定方法。主要从精密度、重现性、加标回收率几方面对氯化铝显色法和硝酸铝显色法进行比较,得出硝酸铝显色法比氯化铝显色法更适合用于测定枸杞子黄酮含量。
(2)采用乙醇回流浸提法提取枸杞中黄酮类化合物,研究了不同乙醇浓度、提取温度、固液比、提取时间、提取次数对黄酮类化合物提取效果的影响。实验结果表明:最佳的提取工艺条件为A1B3C3D3,即:乙醇浓度60%、液固比20∶1、温度70℃、提取时间3h,在此条件下,黄酮提取率可达1.058%。利用响应面法优化超声波提取枸杞黄酮的工艺条件。在单因素实验的基础上,选取液固比、超声温度、超声时间三个因素,应用中心组合试验建立数学模型,以枸杞黄酮得率为响应值,进行响应面分析(RSA)。结果表明,超声波提取枸杞黄酮的最佳工艺条件为:液固比31∶1(V/m)、超声温度71℃、超声时间42min,在此条件下枸杞黄酮得率的预测值为0.99%,实测值为1.07%,相对标准偏差为0.081%。通过对两种提取方法进行比较可知:超声波辅助提取法所得的黄酮含量略高于溶剂回流提取法,且超声波辅助提取时间短,操作简便,大大降低了成本,节省了能源。因此实际操作中应考虑各种因素,适时采用合适的提取方法。
(3)考查了AB-8、D101、X-5、NKA-9、NKA-Ⅱ五种大孔吸附树脂的静态吸附效果,得到AB-8大孔吸附树脂对枸杞黄酮的纯化效果最好,并且作为进一步动态吸附的材料。AB-8大孔吸附树脂纯化枸杞黄酮的最佳工艺参数为:上样液浓度0.9mg/ml、pH值4.0、吸附流速为2BV/h、解吸流速为1V/h、用30%乙醇作为洗脱剂,纯化液中黄酮纯度为29.48%。
(4)以Vc为对照,分别对枸杞黄酮粗提物,大孔吸附树脂层析样品进行了体外抗氧化活性的研究。包括还原能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子能力、清除亚硝基离子能力、清除过氧化氢能力的测定。结果表明:枸杞黄酮具有较强的抗氧化能力,并且经过大孔树脂纯化后,其还原能力和清除自由基能力都明显增强。