肺癌细胞钙粘蛋白E及连环蛋白的差异表达与粘附特性关系的研究

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目的:通过测定三种不同转移能力肺癌细胞上皮型钙粘附蛋白、连环蛋白的差异表达及其粘附特性改变,了解其在肺癌侵袭、转移机制中的作用,为进一步了解肺癌细胞粘附转移机制提供一定的理论依据。方法:将三株肺癌细胞:高侵袭的肺腺癌细胞(A549)、高转移的肺癌细胞(95-D)、低转移的肺腺癌细胞(SPC-A-1)做常规细胞培养,待细胞长满瓶底后,用RIPA和PMSF组成的细胞裂解液提取细胞蛋白质,RNeasy Mini Ki(tRNA抽提试剂盒)提取RNA。Westen-blot和RT-PCR两种方法[1]分别从蛋白质和mRNA水平上检测上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)及连环蛋白(catenins)的表达情况,重复三次取平均值;用LN(层粘连蛋白)包被法测肺癌细胞在不同时段:30、45、60、和75分钟的肺癌细胞粘附百分率[2],并比较。结果:两种方法测得的结果表明:高侵袭肺癌细胞A549与高转移的肺癌细胞95-D的E-cadherin及α、β-连环蛋白表达量低,95-D表达最弱,两者之间差别不明显(P>0.05),低转移的肺癌细胞SPC-A-1除了E-cadherin弱表达外,α、β-连环蛋白与95-D和A549比较呈明显强表达(P<0.05)。从三种肺癌细胞粘附率差别看在75分钟后:95-D为74.76%、A549为67.52%、SPC-A-1为54.25%。低转移肺癌细胞SPC-A-1的粘附率低于高侵袭(A549)、高转移肺癌细胞(95-D)(p<0.05)。结论:不同转移力的肺癌细胞E-cadherin及连环蛋白表达有差异,具有高转移能力的肺癌细胞95-D和A549 E-cadherin及连环蛋白表达量低,粘附率高,脱落后易再粘附发生转移和侵袭。低转移的肺癌细胞SPC-A-1 E-cadherin及连环蛋白表达量相对高,粘附率低,脱落后不易再附着,不易发生转移。说明了E-cadherin及连环蛋白有可能在肺癌细胞侵袭和转移方面扮演着重要角色。
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