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胆红素是血红蛋白的降解产物,当肝脏组织受到损伤或发生病变时,会导致血液中游离胆红素含量增高,人体无法依靠自身代谢排除过高浓度的胆红素。过高浓度的胆红素可以对机体产生严重的神经毒性作用,使胃肠道、脾、肾、性腺、骨髓和呼吸道粘膜等处出现渐进性坏死。其中,未结合胆红素的毒性尤其明显,出现高未结合胆红素血症。对于高胆红素症,通过吸附作用直接从血液中吸附过量的胆红素的血液灌流法是最具吸引力的体外血液净化疗法。这就要求吸附剂具有较好的吸附性能和良好的血液相容性,并且制备容易,成本较低。而通常所用的吸附材料存在着血液相容性较差的问题,如材料表面发生蛋白质的吸附和血小板的黏附聚集,临床上难以达到满意的效果。本论文以壳聚糖为原料,用二氯磷酰胆碱对壳聚糖表面进行改性得到了一种新型的吸附树脂,对改性过程和改性后的性能进行了较系统的研究。本论文主要的研究内容有以下几个方面:(1)在无水条件下通过一步法合成了二氯磷酰胆碱。通过对投料方式和反应配比的研究发现,增加三氯氧磷的投料量,可以显著提高目标产物的含量。同时采用抽气法对产物进行处理,能够进一步的提高产物含量。用改进的磷酸电位滴定法对产物中二氯磷酰胆碱的含量进行了分析,结果表明当三氯氧磷与氯化胆碱按照3∶1的比例投料时,二氯磷酰胆碱的含量可达88%,再将该产物进行抽气处理后二氯磷酰胆碱的含量可增加至96%。(2)用戊二醛对壳聚糖进行交联,制得交联壳聚糖膜。X射线光电子能谱(XPS)、衰减全反射红外光谱(ATR-FTIR)的结果表明壳聚糖成功发生交联,交联度约为17%,同时还确定了实验中所用壳聚糖的脱乙酰度约为92%。在氯仿介质中将二氯磷酰胆碱接枝到交联壳聚糖膜的表面,通过X射线光电子能谱(XPS)、衰减全反射红外光谱(ATR-FTIR)和动态接触角(DCA)等方法对改性后交联壳聚糖膜表面磷酰胆碱基团的接枝率以及亲水性变化进行了分析。ATR-FTIR和DCA的测试结果表明了改性反应的成功,根据XPS的测试数据估算出了改性材料表面磷酰胆碱的接枝率为28%。血小板黏附实验说明了血小板在交联壳聚糖膜表面产生了激活、凝聚。相比之下,在磷酰胆碱改性交联壳聚糖膜表面黏附的血小板基本保持2~4μm的原始尺寸,这表明血小板未发生激活和凝聚。蛋白质吸附试验表明牛血清白蛋白(BSA)在交联壳聚糖表面的吸附量为0.74μg/cm2,而在磷酰胆碱基团改性的交联壳聚糖表面的吸附量为0.21μg/cm2。该结果表明交联壳聚糖表面接枝磷酰胆碱基团后,BSA的吸附量减少了72%。纤维蛋白原(Fg)在交联壳聚糖表面的吸附量为0.87μg/cm2,而在磷酰胆碱基团改性的交联壳聚糖表面的吸附量为0.35μg/cm2,交联壳聚糖表面接枝磷酰胆碱基团后Fg的吸附量减少了60%。血小板黏附和蛋白质吸附实验结果表明,表面接枝磷酰胆碱基团可以显著提高交联壳聚糖膜的血液相容性。(3)采用乳化交联法制备了交联壳聚糖微球,在氯仿介质中用二氯磷酰胆碱制备了改性交联壳聚糖微球。红外光谱结果表明,在2950 cm-1出现了明显的亚甲基伸缩振动峰,同时在1646 cm-1处出现了Schiff碱中-C=N的特征吸收峰,证明了交联反应的完成。与交联壳聚糖微球相比,磷酰胆碱基团改性交联壳聚糖微球在1475 cm-1处的峰明显增强,这是由于磷酰胆碱(PC)基团中N+(CH3)3上的-CH3所造成的,这说明,改性过程的成功。同时扫描电镜结果显示交联壳聚糖微球的粒径约为100μm,改性前后交联壳聚糖微球的大小和表面形貌未发生明显变化,说明改性过程未改变交联壳聚糖微球的表面形貌。蛋白吸附实验显示,改性前后的树脂微球对BSA的吸附量随吸附时间的增加而增加;相同吸附时间下,磷酰胆碱改性交联壳聚糖微球对BSA的吸附容量明显低于交联壳聚糖微球的吸附容量。对胆红素的吸附实验显示,磷酰胆碱接枝改性的交联壳聚糖微球,在显著降低蛋白质吸附的同时,对胆红素的吸附量和清除率没有明显降低。在37℃、pH=7.4、初始浓度为10μg/mL的胆红素溶液中吸附2 h后,基本达到吸附平衡,对胆红素的吸附率可达最大吸附量的93%。该初步研究结果说明,通过表面磷酰胆碱接枝改性,血液灌流吸附剂非选择性降低血液中蛋白含量的这一关键问题可能得到解决。该研究对发展血液灌流材料,提升血液灌流技术水平提供了新途径。