弥漫性轴索损伤后易损区胶质疤痕形成的实验研究

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研究目的拟通过免疫组化、透视电镜观察等方法研究大鼠DAI后易损区神经胶质疤痕形成的时间和空间分布规律。研究方法1.使用自主研制的可同时产生瞬间角加速和线加速运动的实验装置(专利号:ZL200920067463.4)建立DAI大鼠模型,使用HE染色、免疫组化染色易损区病理变化过程。2.免疫组化应用β-APP标记DAI后ROI神经丝损伤的情况。3.免疫组化应用GFAP标记DAI后反应性星形胶质细胞、Iba-1标记DAI后活化的小胶质细胞,应用Image-Pro Plus (IPP)5.0软件定量评估DAI大鼠易损区域胶质疤痕形成的程度。4.运用免疫荧光技术标记大鼠DAI后海马、胼胝体、内囊感兴趣区域(region ofinterest, ROI)星形胶质细胞和小胶质细胞活化的情况及神经丝损伤的情况,以探索DAI后胶质疤痕形成的定性评估。研究结果1.HE染色检测到非占位性微出血灶;免疫组化染色发现轴缩球形成、神经微丝缠结形成。2.脑干、胼胝体、内囊、白质等易损区免疫组化染色发现轴缩球形成、神经微丝缠结形成、髓鞘崩解,各易损区IOD值较对照组均显著性增高,有统计学意义;伤后各ROI的星形胶质细胞活化数量第3天明显增加,7天达到最大值,持续到1个月。3.DAI后,易损区活化的小胶质细胞IOD值在各时间点较对照组有统计学意义。伤后第3天活化的小胶质细胞明显增加,第7天达到最高值并开始逐渐降低,持续到伤后1个月。4.DAI后,损伤的神经丝周围聚集着大量的活化星形胶质细胞和小胶质细胞,易损区存在着阻碍神经再生的“微疤痕”。研究结论大鼠DAI致伤后易损区微环境中存在不同程度的微胶质疤痕形成,并具有一定的时空规律。
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