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目的:研究褪黑素调控PINK1/Parkin通路改善多囊卵巢综合征患者颗粒细胞线粒体损伤的分子机制。方法:Western Blot 检测多囊卵巢综合征（Polycystic ovarian syndrome,PCOS）患者卵巢颗粒细胞PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平,透射电镜观察颗粒细胞线粒体超微结构和自噬小体,线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测颗粒细胞线粒膜电位和线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）含量的变化,并通过qRT-PCR检测SIRT1的表达情况。利用人卵巢肿瘤颗粒细胞系KGN体外实验,通过Western Blot、透射电镜、JC-1染色、qRT-PCR等技术研究双氢睾酮（Dihydrotestosterone,DHT）刺激KGN细胞后,SIRT1的表达变化、PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平、线粒体功能变化以及褪黑素（Melatonin,Mel）对此种变化的影响。体外培养对照组和PCOS患者卵巢颗粒细胞,给予褪黑素刺激后,Western Blot检测SIRT1的表达量。体外应用SIRT1 siRNA转染KGN细胞24h,给予DHT和褪黑素刺激,检测细胞自噬水平的变化。构建PCOS小鼠模型,在褪黑素治疗前后分别通过Western Blot检测小鼠卵巢颗粒细胞PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平,透射电镜观察颗粒细胞线粒体超微结构和自噬小体,ELISA检测小鼠血清促黄体生成素（Luteinizing Hormone,LH）、卵泡刺激素（Follicle-Stimulating Hormone,FSH）和睾酮（Testosterone,T）水平变化。结果:第一部分结果显示与正常对照组（n=6）相比,PCOS患者（n=6）卵巢颗粒细胞中 PINK1（P<0.001）、Parkin（P<0.01）、LC3B-Ⅱ（P<0.0001）、Beclin-1（P<0.001）蛋白表达显著升高,P62水平显著降低（P<0.001）。PCOS患者较对照组相比线粒体膜电位水平显著下降（P<0.05）,mtDNA含量下降（0.65±0.17 vs.0.95±0.10,P<0.01）。PCOS患者卵巢颗粒细胞中SIRT1mRNA水平较对照组显著降低（0.41±0.08 vs.1.26±0.18,P<0.01）。第二部分结果显示500nM DHT刺激KGN 24h后,SIRT1蛋白表达量显著下降（0.44±0.06 vs.1.0±0,P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3B-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达增多,P62水平降低,线粒体膜电位及mtDNA含量明显下降,100pM褪黑素治疗后,SIRT1表达量增高,PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平下降,线粒体膜电位和线粒体DNA含量升高。体外培养人卵巢颗粒细胞,褪黑素能升高PCOS患者卵巢颗粒细胞SIRT1蛋白表达水平（P<0.05）。SIRT1 siRNA沉默KGN SIRT1后,褪黑素不能降低DHT导致的异常升高的自噬水平。PCOS模型小鼠动情周期紊乱,与对照组小鼠相比,血清中 T 水平升高(299.11±25.70nmol/ml vs.220.93±31.63 nmol/ml,P<0.001 和 LH/FSH 比值显著升高（0.98±0.09 vs.0.86±0.07,P<0.05）,卵巢呈囊性改变且窦卵泡数目增多（147.83±29.73 vs.112.67±24.10,P<0.05）。与对照组小鼠相比,PCOS小鼠卵巢中PINK1、Parkin、LC3B-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达增多,P62水平降低,透射电镜观察显示线粒体数目减少、结构异常,自噬小体增多。在给予褪黑素治疗后,PCOS治疗组小鼠卵巢较PCOS对照组相比PINK1、Parkin、LC3B-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达水平下降,P62水平高,自噬小体数目减少;PCOS治疗组小鼠小鼠血清中T水平较PCOS对照组下降（249.7 ±5.96nmol/ml vs.270.8±3.70nmol/ml,P<0.05）、,LH/FSH 比值降低（0.88±0.02 vs.1.00±0.04,P<0.05）,窦卵泡数目减少（127.67±22.08 vs.162.17±25.92,P<0.05）。结论:PCOS患者卵巢颗粒细胞中PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平升高,线粒体膜电位下降,线粒体DNA含量降低,提示线粒体功能受损。褪黑素处理后降低卵巢颗粒细胞PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平,升高线粒体膜电位和线粒体DNA含量,改善线粒体损伤。褪黑素治疗PCOS模型小鼠能够抑制卵巢中PINK1/Parkin介导的线粒体自噬水平,改善线粒体损伤;降低血清T、LH的水平和窦卵泡数目,改善其表型。褪黑素通过调控PINK1/Parkin通路可以改善PCOS卵巢颗粒细胞线粒体损伤,提示褪黑素作为治疗PCOS的潜在药物可进一步临床研究。