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目的:慢性应激事件是抑郁症发生的重要启始因素。深入研究应激导致抑郁的发病机制,寻找新的抑郁标志物,并在此基础上开发新型抗抑郁药物是目前抑郁研究的热点。成纤维素细胞生长因子(FGF)家族是一类通过FGF受体发挥广泛生物作用的细胞因子,其中FGF9近期被报道与抑郁发生密切相关。本论文通过建立慢性束缚应激(CRS)诱导的小鼠抑郁模型,探讨了慢性应激导致抑郁是否与FGF9及其受体FGFR3通路的改变有关。在此基础上,评价了天然药物鼠尾草酸(CA)抗抑郁作用及其作用是否与调节FGF9-FGFR3通路有关。方法:(1)慢性束缚应激小鼠模型的建立:雄性ICR小鼠52只,体重18.2～21.5g,除正常对照组20只外,其余小鼠束缚在50m L离心管内,管直径为3.0cm,长约10cm,管壁有6～7个直径为0.5mm的通风口,每日的束缚时间为10h,除了束缚期间小鼠禁食禁水,其余时间正常喂养。造模28天后,依据糖水偏爱结果将动物随机分为束缚模型组和解束缚组,束缚模型组动物继续进行束缚和孤养,直至造模56天,解束缚组动物每天不再进行束缚和孤养。各组动物分别于造模28天、56天进行自主活动、糖水偏爱、悬尾行为学检测后进行眼眶采血并取海马组织。海马组织进行常规组织病理学检查;采用ELISA法检测血清、海马组织中FGF9、FGF2含量;Real time PCR法检测海马组织FGF9 m RNA表达量;免疫组化和Western blot法检测海马组织中FGFR3蛋白表达量。(2)天然药物CA对慢性束缚应激小鼠模型的影响:雄性ICR小鼠100只,体重18.5～21.8g,除正常对照组20只外,其余小鼠进行束缚(方法同上),在动物连续造模28天后根据糖水偏爱结果对动物进行分组,分别为:束缚模型组、阳性对照药氟西汀组(5.7mg/kg)、鼠尾草酸低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100mg/kg)剂量组,分组后继续进行束缚和孤养。分组后正常对照组和束缚模型组每天灌胃给予蒸馏水,其余各组分别灌胃给予相应药液,给药体积为20ml/kg,连续给药28天。分别于分组后当日及末次给药后对各组动物进行与上述相同的行为学和生理生化指标检测。结果:(1)慢性束缚应激小鼠模型的建立:(1)体重:与正常对照组比较,造模后28天、56天时束缚模型组小鼠体重均明显降低(P<0.01),与束缚模型组比较,解束缚组小鼠体重无明显差异。(2)自主活动测试:造模后28天、56天时束缚模型组小鼠爬壁站立次数、活动时间明显减少(P<0.05或P<0.01),与束缚模型组比较,解束缚组小鼠56天爬壁站立次数和活动时间明显增加(P<0.05或P<0.01)。(3)糖水偏爱:造模28天、56天束缚模型组小鼠糖水偏爱指数明显下降(P<0.01);与束缚模型组比较,解束缚组小鼠造模28天、56天糖水偏爱指数均无显著性差异。(4)悬尾测试:与正常对照组比较,造模28天、56天时活动比明显降低(P<0.01或P<0.05);与束缚模型组相比,造模28天、56天时解束缚组活动比无明显差异。(5)海马组织常规组织病理学检查:造模56天时正常对照组小鼠海马组织细胞排列紧密,椎体细胞正常,束缚模型组小鼠海马细胞排列稀疏紊乱,部分椎体细胞坏死。解束缚组小鼠海马细胞排列稀疏紊乱,少量椎体细胞坏死。(6)血清、海马组织中FGF9、FGF2含量:与正常对照组比较,造模28天、56天束缚模型组小鼠血清、海马组织FGF9明显升高(P<0.01),FGF2含量明显降低(P<0.05或P<0.01);与束缚模型组比较,造模28天,56天解束缚组小鼠血清、海马组织FGF9、FGF2含量无显著性差异。(7)小鼠海马组织FGF9 mRNA表达量:与正常对照组比较,束缚模型组、解束缚组小鼠造模28天、56天海马组织FGF9 mRNA表达量明显增加(P<0.05);与束缚模型组比较,解束缚组造模28天、56天FGF9 mRNA表达量无明显差异。(8)海马组织免疫组化检查:造模56天时,与正常对照组比较,束缚模型组小鼠海马组织FGFR3表达量明显降低(P<0.01),与束缚模型组比较,解束缚模型组小鼠海马组织FGFR3含量无明显差异。(9)Western blot检测海马中FGFR3表达:与正常对照组比较,造模28天、56天束缚模型组小鼠海马FGFR3蛋白表达水平下调(P<0.05);与束缚模型组比较,解束缚组小鼠海马FGFR3蛋白表达水平无明显差异。(2)鼠尾草酸对慢性束缚应激小鼠模型的影响:鼠尾草酸高剂量(100mg/kg)能明显增加小鼠体重(P<0.05);鼠尾草酸低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高剂量(100mg/kg)明显增加小鼠爬壁站立次数(P<0.01);鼠尾草酸高剂量(100mg/kg)明显增加小鼠活动时间(P<0.05);鼠尾草酸中(50mg/kg)、高剂量(100mg/kg)组小鼠糖水偏爱指数、活动比均明显升高(P<0.05或P<0.01);鼠尾草酸低、中剂量能明显改善海马组织病理改变;鼠尾草酸中(50mg/kg)、高剂量(100mg/kg)能明显降低血清、海马组织FGF9含量(P<0.05),升高血清、海马组织FGF2含量(P<0.05);鼠尾草酸中、高剂量能明显降低FGF9 mRNA表达量(P<0.05);且能明显升高海马组织FGFR3表达量(P<0.05)。结论:长期慢性束缚应激所导致小鼠抑郁与海马组织中FGF9-FGFR3通路改变有关,FGF9可能是抑郁的一个新的生物标志物。天然药物鼠尾草酸能明显改善慢性束缚应激导致的小鼠抑郁状态,其抗抑郁作用与调节FGF9-FGFR3通路有关。本研究提出了慢性应激导致抑郁的发生的新机制,为抗抑郁药物的开发提供了新思路。