拟南芥微丝解聚因子ADF8和ADF11的功能初探

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根毛是由根部表皮细胞选择性分化后,历经极性生长发育而成的管状结构。根毛的发生增加了植物根系的表面积,促进了植物对于水分和营养物质的吸收及利用。因此,根毛细胞的发育和根毛的生长是植物形成完整根系结构的关键步骤。近期研究表明,根毛的生长是一个非常典型的极性生长过程,微丝骨架通过为囊泡运输和胞质环流提供分子轨道的生理活动,参与了根毛的极性生长。微丝解聚因子(ACTIN DEPOLYMERIZING FACTOR,ADF)通过调节微丝骨架的聚合和解聚,可能参与到根毛发育过程中。然而,目前ADF家族成员通过微丝骨架动态介导调节参与根毛生长的分子机理仍然不清楚,亟待深入研究。因此,本研究以拟南芥为研究材料,利用实时定量PCR、体外蛋白纯化、绿色荧光定位等技术对ADF8/11基因的功能进行了探索,以揭示ADF8/11在调控根毛发育和生长过程中的分子机制,并已取得了如下主要研究结果:1、通过半定量PCR和RT-QPCR分析,揭示ADF8/11在拟南芥中各组织的表达模式。拟南芥ADF8在各组织中几乎没有表达,只特异地在根中大量表达;而ADF11在各组织中均有表达,但根中表达量最高。2、构建原核表达载体,并诱导、纯化出包含HIS标签的ADF8/11蛋白。此结果可作为体外高低速共沉淀实验的研究材料,并为探索ADF8/11蛋白的具体功能奠定基础。3、通过ADF8/11的亚细胞定位研究,基本确定ADF8/11基因在拟南芥发育时期的根毛细胞中可以与微丝共定位。4、获得ADF8/11RNAi干扰的转基因株系,为研究基因功能提供基础材料。综上所述,我们可以确定ADF8/11在根中大量表达,同时,ADF8//11在细胞内与微丝共定位。拟南芥ADF8/11突变体植株已成功获得,将为后续的实验提供良好的研究材料,为ADF8/11基因功能的研究打下基础。ADF8/11基因功能研究将会进一步揭示植物根毛的发育机制,同时,为根的生长发育、植物体微丝骨架研究提供了理论依据和科学基础。
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