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油菜是世界主要油料作物之一,在我国其栽培面积约占油料作物总面积的48%,达600余万公顷[1]。菜籽油是我国国民最重要的食用油之一,占食用油的40%-45%[2]。油菜籽是潜在的生物柴油的原料,是未来解决能源问题的重要原料作物。
以遗传图谱不同连锁群上的分子标记为媒介,筛选BAC文库,从而获得连锁群特异的BAC克隆,以这些特异BAC克隆为探针进行荧光原位杂交,实现细胞学图和遗传学图的整合,为以后开展基因的结构和功能等方面的研究打下基础。
本研究结合现有的甘蓝型油菜SSR标记遗传图谱选择十九个连锁群上特有的160个SSR标记作为连锁群特异SSR标记,并以此采用PCR四维筛选法筛选甘蓝型油菜-新疆野生油菜二体异附加系BAC文库。得到甘蓝型油菜十九个连锁群特异BAC克隆71个。得到的这些特异克隆,为今后FISH、Fiber-FISH将连锁群、与特异克隆相关联的基因片段定位在染色体上奠定了基础。另外,以此作为靶标,利用多色、重复FISH技术我们将一个与重要基因连锁的BAC克隆进行了物理定位,对以后遗产距离与物理距离间关系分析等均具有重要价值。
研究结果如下:
●根据Piquemal等人[3]构建的甘蓝型油菜遗传图谱,选用甘蓝型油菜19个连锁群特异的SSR分子标记共160个,以这些SSR标记从BAC文库中筛选得到各连锁群特异BAC克隆共71个。
●对得到的这些BAC克隆,进行初步的鉴定。