加味大柴胡汤抗家兔实验性动脉粥样硬化作用机制的实验研究

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动脉粥样硬化(AS)是多病因的疾病,其主要危险因素有:血脂异常、高血压、吸烟、糖尿病等。近年来,随着生活水平的提高,本病发生呈上升趋势。AS所致的心脑血管疾病严重威胁人类的健康。本论文通过动物试验,从细胞分子水平对中药加味大柴胡汤防治AS的机理进行了较为深入的探讨,并对中西医防治AS的进展进行了较为全面的概述。实验研究:目的采用高脂饲料喂养家兔造成实验性动脉粥样硬化模型,观察加味大柴胡汤对家兔实验性AS的形成、对血管壁平滑肌细胞表型及相关原癌基因c-myc表达的影响,以及与AS炎症反应相关细胞因子主动脉单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、主动脉抗原CD40-CD40L、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:本实验分正常对照组,AS模型对照组,加味大柴胡汤预防组,加味大柴胡汤治疗组和血脂康阳性对照组。治疗组造膜6周后开始给药,其余各组持续喂养10周,观察加味大柴胡汤对实验性AS家兔的血脂、氧自由基、C反应蛋白(CRP)的影响。通过光镜、电镜观察各组主动脉的病理形态学变化,观察此药对血管壁平滑肌细胞表型的影响,采用原位杂交方法,观察对相关原癌基因c-myc表达的影响。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR法)蛋白质印迹杂交(western Blot)及免疫组化法,进一步观察加味大柴胡汤对实验性AS家兔炎症反应相关细胞因子主动脉单核细胞趋化因子—1(MCP-1)、主动脉抗原CD40、CD40L、ICAM-1mRNA及蛋白表达的影响,探讨此药抗AS的作用机制。结果显示:加味大柴胡汤能降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇及脂质过氧化酶;提高超氧化物歧化酶、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶;抑制原癌基因的表达。尤其加味大柴胡汤预防组降低血清CRP的水平优于治疗组和血脂康组,有显著性差异P<0.05、P<0.01。对MCP-1、ICAM-1表达的影响,加味大柴胡汤预防组与治疗组、血脂康组比较明显降低,经统计学处理P<0.01,有极显著性差异;。说明加味大柴胡汤能降低MCP-1、ICAM-1的表达,以早期用药效果显著。对CD40、CD40L表达的影响,加味大柴胡汤预防组与治疗组比较明显降低P<0.01,预防组与血脂康组比较无显著性差异。结论:加味大柴胡汤具有以下几方面作用①具有明显的调节脂质代谢,抗脂质过氧化损伤的作用;②阻断主动脉内膜的增生,抑制血管壁平滑肌细胞表型的改变;③阻抑原癌基因的表达;④降低血清CRP水平;⑤抑制实验性家兔主动脉内膜AS斑块处炎性因子MCP-1、ICAM-1、CD40、CD40L的表达,从而抑制主动脉内膜的炎症反应,防止AS的产生。因此,加味大柴胡汤防治AS的机理与调节血脂,抗脂质过氧化损伤,抑制血管壁平滑肌细胞表型的改变,阻抑原癌基因c-myc的表达,减少主动脉炎性因子的表达等有关。该实验研究结果将为加味大柴胡汤进一步的临床推广应用提供理论依据。理论研究以AS从痰瘀论治及炎性因子与AS的关系二方面进行阐述。具体包括“高脂血症的防治与中医养生学”、“冠心病从痰瘀论治”、“CD40与AS的关系”、“单核细胞趋化因子与AS的关系”、“AS现代医学研究进展”、“AS的中医药研究概况”。在理论研究及文献综述中,参照古今中医有关文献对动脉粥样硬化的中医病名、病因病机、辨证治疗方法、临床及实验研究进展和中医研究中存在的问题及对策进行了探讨。强调从痰瘀论治动脉粥样硬化,并对现代医学在动脉粥样硬化研究中所取得的进展进行了总结,进一步明确了动脉粥样硬化的病理特征、发病机制和治疗原则。并具体探讨了现代医学关于炎性因子(主动脉抗原CD40-CD40L和单核细胞趋化因子—1)在动脉粥样硬化发病机制中的作用。
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