功能核酸应用于水体重金属快速检测方法研究

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我国重金属污染严峻,重金属不仅污染环境,更对人类健康造成极大的危害。传统的重金属检测方法具有高灵敏度、高精确度等优点,但无法满足快速实时检测的要求。因此,开发简便、快捷、灵敏度高的重金属检测方法十分重要。功能核酸是近年来快速发展的一类新型识别元件,可以和目标分子高亲和性和高特异性结合,具有稳定性好、易于合成和无毒等优点。近年来,功能核酸被广泛的应用于分析检测等领域,以功能核酸为基础的研究和应用受到了广泛的关注。本文以功能核酸为基础,利用荧光法对水体中银离子、汞离子和铅离子进行检测,主要研究内容如下:(1)基于银离子特异性DNA(Ag-CC)和纳米金(Au NPs)对罗丹明B(Rho B)荧光的影响检测银离子。该方法利用Au NPs淬灭荧光染料的特性:分散状态下的Au NPs对Rho B荧光淬灭能力强,而聚集状态下的Au NPs对Rho B荧光淬灭能力弱。检测体系的最佳检测条件为:500μL的检测体系中含有250μL Au NPs,0.12 M Na NO3,15 n M Ag-CC和8μM Rho B。该方法对Ag+的检测范围为2.73~1500 ppb,检测下限为2.73 ppb。(2)基于汞离子特异性DNA和Au NPs对Rho B荧光的影响检测汞离子。该方法利用Au NPs聚集分散状态对荧光染料Rho B荧光强度淬灭能力的不同而达到检测汞离子的目的。检测体系的最佳检测条件为:500μL的检测体系中含有200μL Au NPs,0.12 M Na Cl,20 n M汞离子特异性DNA和8μM Rho B。该方法对Hg2+的检测下限为2.16 ppb,检测范围为2.16~1000 ppb。(3)基于整合功能核酸(修饰的T30695)和荧光染料检测铅离子和汞离子。检测体系中的荧光染料SYBR Green I(SG)与不同构象的核酸作用后呈现不同的荧光强度。Pb2+检测体系最佳条件为:500μL检测体系中含有50 n M修饰的T30695,6μL 400×SG。Hg2+检测体系最佳条件为:500μL检测体系中含有50 n M修饰的T30695,4μL 50×SG。该方法对Pb2+和Hg2+的检测限分别为2.09 ppb和1.14 ppb,检测范围分别是2.09~500 ppb和1.14~300 ppb。本论文在基于C-Ag+-C发夹结构检测Ag+,T-Hg2+-T发夹结构检测Hg2+,设计整合功能核酸进行双靶标检测等方面做出了一些创新,存在的不足是离实际应用还有一定的距离,后续研究将向此努力。
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