体外抗鼻咽癌中药筛选模型的建立及应用研究

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鼻咽癌是常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人民群众的健康。本课题旨在我国业已分离出的鼻咽癌细胞株的基础上,通过细胞生物学、分子生物学技术,找出适用的体外中药筛选模型,从中筛选出高效、低毒、价廉的抗鼻咽癌药物;并通过此方法试筛茶多酚、薏苡仁酯和黄芪三种中草药对肿瘤细胞的抑制作用。在体外培养的鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、SUNE-1和5-8F的基础上,主要采用MTT法、化学发光法(ATP法)、流式细胞仪、电子显微镜等技术构建了抗鼻咽癌中药筛选的初步模型,并通过此模型试筛中草药茶多酚、薏苡仁酯和黄芪分别作用于四株鼻咽癌细胞后对肿瘤细胞生长的抑制情况,以及此三种中草药诱导鼻咽癌细胞凋亡的情况。MTT法、化学发光法的结果显示在本实验中茶多酚在较低浓度时对体外鼻咽癌细胞生长无抑制作用,较高浓度时对鼻咽癌细胞生长有抑制作用,并随浓度的增高,抑制作用增强,随时间的增加,在7天范围内,抑制作用变化趋势不明显;薏苡仁酯对体外鼻咽癌细胞生长有抑制作用,随着浓度的增高,抑制作用增强,随时间的增加,在7天范围内,抑制作用变化趋势不明显;黄芪对体外鼻咽癌细胞生长无抑制作用。流式细胞仪结果显示茶多酚能使鼻咽癌细胞G1期细胞减少,S期细胞增多,从而使进入G2/M期的细胞减少,并在48小时内随时间的延长,作用逐渐增强;薏苡仁酯使进入G2/M期的鼻咽癌细胞减少,并在48小时内随时间的延长,作用逐渐增强。电子显微镜观察细胞凋亡超微结构的结果显示茶多酚能诱导鼻咽癌细胞产生凋亡小体,并在48小时内随时间的延长,凋亡发生率增高,薏苡仁酯诱导鼻咽癌细胞产生凋亡小体,并在48小时内随时间的延长,凋亡发生率增高。实验结果表明:用该模型来筛选抗鼻咽癌的中草药简便有效;试筛茶多酚、薏苡仁酯和黄芪三种药物显示:茶多酚、薏苡仁酯在体外可以抑制鼻咽癌细胞的生长,其作用机理与诱导肿瘤细胞发生凋亡有关,黄芪在体外对鼻咽癌细胞的生长无抑制作用。
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