【摘 要】
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目的用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)偶联米托蒽醌脂质体(LEM)制备米托蒽醌免疫脂质体(LEM-GM-CSF),并观察其对急性髓性白血病多药耐药细胞株HL60/ADM细胞的作用,为临床治
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目的用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)偶联米托蒽醌脂质体(LEM)制备米托蒽醌免疫脂质体(LEM-GM-CSF),并观察其对急性髓性白血病多药耐药细胞株HL60/ADM细胞的作用,为临床治疗难治性或复发性急性髓性白血病探索新方法提供实验依据。方法用逆向蒸发法制备LEM,高速离心法分离LEM和游离的DHAQ溶液,比色法测定包封率,透射电镜下观察LEM的结构和粒径,再以戊二醛交联法偶联GM-CSF和LEM制备出LEM-GM-CSF,紫外分光光度法测定偶联率,流式细胞术测定LEM-GM-CSF中GM-CSF的活性保留率。通过MTT法测定LEM-GM-CSF作用后HL60/ADM细胞存活率,用GM-CSF阻断试验验证其特异性;透射电镜观察细胞形态学改变; Annexin-V/PI双染后,用流式细胞术测定细胞凋亡率;用RP-HPLC法检测细胞内DHAQ浓度。结果1、LEM的包封率:80%;多为单层脂质体,粒径:170～220nm;LEM-GM-CSF的偶联率:42.3%;活性保留率74.6%。2、LEM-GM-CSF、LEM及DHAQ对HL60/ADM细胞均具有杀伤作用,其中LEM-GM-CSF和LEM的杀伤作用显著强于DHAQ,而LEM-GM-CSF的杀伤作用又显著强于LEM。LEM-GM-CSF、LEM及DHAQ对HL60/ADM细胞作用24h的IC50分别是8.73ug/ml、12.42ug/ml、
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