【摘 要】
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蛇毒是自然界最丰富的天然毒性蛋白混合物之一,很早就引起了国内外科研工作者的注意。蛇毒金属蛋白酶（metalloproteinase）属酸性蛋白酶（acidic proteinases）家族,后者广泛存在于细菌直到哺乳动物体内。蛇毒金属蛋白酶是蛇毒主要功能性蛋白质之一,需二价阳离子如Zn2+、Ca2+来维持其酶活性和结构的完整性。除了酶的作用之外,蛇毒金属蛋白酶还可以通过其它因子抑制血小板聚集和增加
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蛇毒是自然界最丰富的天然毒性蛋白混合物之一,很早就引起了国内外科研工作者的注意。蛇毒金属蛋白酶（metalloproteinase）属酸性蛋白酶（acidic proteinases）家族,后者广泛存在于细菌直到哺乳动物体内。蛇毒金属蛋白酶是蛇毒主要功能性蛋白质之一,需二价阳离子如Zn2+、Ca2+来维持其酶活性和结构的完整性。除了酶的作用之外,蛇毒金属蛋白酶还可以通过其它因子抑制血小板聚集和增加毛细血管通透性从而引起出血。作为一种潜在的血小板聚集抑制剂和抗癌抗肿瘤药物,对中华眼镜蛇毒金属蛋白酶的进一步研究十分必要。通过离子交换和凝胶过滤层析的方法,依次使用Sephadex C-25柱、Sephadex A-25柱、Sephadex G-75柱等层析步骤,从中华眼镜蛇（Naja atra）毒液中分离纯化得到一酸性蛋白酶,初步实验结果表明该蛋白酶是一金属蛋白酶,其丰度约为0.1%。以酪蛋白为底物测得其蛋白质水解酶比活力为0.0967 U/mg; Ca2+、Cu2+和Zn2+对其酶活性有明显的增强作用；Fe3+、β-巯基乙醇和EDTA对酶活性有明显的抑制作用,Mg2+对酶活力的增强作用不明显,而K+和Na+对酶活力的抑制作用相对较小；该金属蛋白酶有酪蛋白酶活性；其SDS-PAGE电泳显示为单一条带,分子量为71 kDa。与相关的研究结果对比金属离子及抑制剂对其酶活性的影响及其分子量,初步确定该金属蛋白酶是一个新发现的蛋白酶。采用MTT法检测了此蛇毒金属蛋白酶对Hela细胞株、PC-12细胞株的抗肿瘤活性,结果发现,由于蛇毒金属蛋白酶对细胞外基质的降解作用,对体外肿瘤细胞具有一定的抑制作用,对本实验中采用的两种细胞都有较为明显的抑制效应,可以作为一种潜在的抗癌或抗癌辅助药物予以进一步的研究。
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