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氢醌(hydroquinone,HQ)广泛存在于自然界,是工农业生产中常用的化学物,同时氢醌也是苯在体内的主要代谢产物之一。国内外有关HQ毒性的研究包括遗传毒性、血液毒性、肾毒性、神经毒性、细胞毒性等,其中血液毒性尤为关注。2Cys巯基还蛋白过氧化物酶(2-Cys Peroxiredoxins ,2-Cys Prxs)属于抗氧化酶的家族成员,其主要功能是抗氧化和调节过氧化氢介导的信号转导作用,还参与细胞周期进程以及发挥分子伴侣作用等。课题组前期研究发现在人胚肺成纤维细胞MRC-5中,HQ的毒性可能与2-Cys Prxs有关,为进一步探讨HQ的血液毒性与2-Cys Prx间的关系,本课题进行如下研究。【目的】探讨HQ对人外周血淋巴细胞毒性作用;探讨HQ对2-Cys Prxs各成员表达的影响。【方法】取正常人新鲜外周血,分离人外周血淋巴细胞。①给予0、1、5、50μmol/L HQ刺激24小时后,AnnexinV-PI双染色法经流式细胞仪检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR测定2-Cys Prxs各成员的表达变化。②以10μg/ml植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)作为淋巴细胞增殖刺激因子,同时给予0、1、5、50μmol/L HQ处理24小时,CCK-8法(Cell Counting Kit-8)经酶标仪检测细胞增殖情况;ELASA法检测培养液上清TNF-α、IFN-γ、IL-17等细胞因子含量;实时荧光定量PCR测定2-Cys Prxs各成员的表达变化。【结果】1.与对照组比较,HQ浓度大于5μmol/L时,随着浓度增加,淋巴细胞存活率逐渐降低(P<0.01),当HQ浓度为5μmol/L时早期凋亡率明显升高(P<0.05),HQ浓度为50μmol/L时,早期凋亡率下降,晚期凋亡和死亡率升高( P<0.01)。2.随着HQ浓度的增加,各HQ+PHA组细胞增殖抑制率与PHA组比较逐渐增高(P<0.01)。3. PHA组TNF-α、IFN-γ、IL-17的含量与对照组比较有增加的趋势,其中IFN-γ含量明显增高,有显著差异(P<0.05)。随着HQ浓度增加,各HQ+PHA组TNF-α、IFN-γ、IL-17的含量与PHA组比较有逐渐减少的趋势,50μmol/LHQ+PHA组TNF-α、IFN-γ、IL-17的含量显著减少(P<0.05)。4.与对照组比较,随着HQ浓度的增加,PrxII、PrxIII、PrxⅣ的表达水平均有增高的趋势,当HQ染毒浓度为50μmol/L时,PrxII的相对表达量与对照组比较明显增加(P<0.05),各组中PrxI的相对表达量均无明显差异。PHA组PrxII和PrxⅣ基因表达水平有降低的趋势,PrxIII的表达水平有增高的趋势,但未见统计学差异。与PHA组比较,随着HQ浓度增加,各HQ+PHA组PrxII、PrxIII表达水平有增加的趋势,当HQ浓度为50μmol/L时,PrxIII的相对表达量显著升高(P<0.05),各组中PrxI的相对表达量均无明显差异。【结论】1. HQ可诱导人外周血淋巴细胞凋亡; 2. HQ可抑制人外周血淋巴细胞增殖; 3. HQ可抑制人外周血淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-17; 4. HQ能够上调PrxII、PrxIII的表达。