环丙氨嗪是一种三嗪类化合物,作为饲料添加剂被广泛应用于畜牧养殖业。它在环境中具有迁移性,可以进入人体内,对人体健康产生影响。环丙氨嗪在动物和植物体内可通过脱烷基作用代谢为三聚氰胺,长期摄入三聚氰胺会导致肾结石和肾衰竭。2008年毒奶粉事件后三聚氰胺被广泛关注,然而大众忽略了对三聚氰胺的代谢原药环丙氨嗪的关注。随着政府后续对奶制品检测范围的扩大,环丙氨嗪才逐渐进入了人们的视线。如今,在牛奶出厂前都要按照国家标准严格的检测牛奶中环丙氨嗪和三聚氰胺的残留量,而出厂前牛奶数量众多,因此如何在出厂前快速检测牛奶中的环丙氨嗪已成为热门话题。传统的环丙氨嗪检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱质谱法等,由于其步骤繁琐、检测费用高等原因不适用于现场快速检测。因此研究建立高效、快速、经济的检测方法检测环丙氨嗪具有重要的理论价值和实用意义。核酸适配体制备方法十分简易,不易降解,并且标记方法多种多样,因而本研究以核酸适配体为基础,选择不同的信号输出技术开发出了三种快速检测牛奶中环丙氨嗪的方法。基于环丙氨嗪特异性核酸适配体和荧光淬灭开发出了一种快速检测牛奶中环丙氨嗪的方法。当用FAM标记的富含G的特异性核酸适配体Tcy2处理环丙氨嗪时,可以形成G-四联体-环丙氨嗪复合物并引起荧光变化。在最优检测条件下,该方法的检测范围为0-200ppb,检测限为0.68ppb。基于环丙氨嗪特异性核酸适配体和纳米金比色法开发出了一种快速检测牛奶中环丙氨嗪的方法。适配体可以吸附在纳米金的表面并与聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)发生静电相互作用,从而保护Au NPs不会聚集,当加入环丙氨嗪后,可以形成G-四联体-环丙氨嗪复合物,随后纳米金在PDDA溶液中被聚集,肉眼可见溶液颜色由红色变成紫色甚至蓝色。在最优检测条件下,该方法的检测范围为0-1ppm,检测限为5.8ppb。基于环丙氨嗪特异性核酸适配体和表面增强拉曼技术开发出了一种快速检测牛奶中环丙氨嗪的方法。适配体与环丙氨嗪特异性结合后在其表面原位还原纳米银,此时可以形成环丙氨嗪-DNA/Ag NPs复合物并引起拉曼增强效应。在最优检测条件下,该方法的检测范围为0-0.5ppm,检测限为23.6ppb。