目的非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）是中国癌症相关死亡的首要原因。KRAS（kirsten rat sarcoma）是NSCLC中最常见的原癌基因之一,KRAS突变型NSCLC的治疗一直很困难,直到近年来才有了重大突破。SHP2（src homology 2（SH2）-containing protein tyrosine phosphatase 2）是KRAS突变肿瘤的新靶点,KRAS突变型NSCLC的生长依赖于SHP2。由于SHP2参与调控上皮肿瘤细胞和免疫细胞的活性,我们推测SHP2可能在KRAS突变型肿瘤的免疫治疗中发挥关键作用并影响临床疗效。在本研究中,我们重点研究了SHP2的表达及其在接受免疫检查点抑制剂治疗的KRAS突变型NSCLC患者中的预测和预后意义。我们进一步探索肿瘤免疫环境,并分析SHP2与免疫细胞的相关性。方法本研究分为两个部分。第一部分收集91例晚期KRAS突变型肺腺癌患者,采用二代测序（next-generation sequencing,NGS）和免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）实验方法,分析了晚期KRAS突变型肺腺癌的基本临床资料、基因突变特征和生存分析。第二部分纳入经免疫治疗的61例KRAS突变型肺腺癌患者。采用了NGS、IHC和多重免疫荧光细胞化学（multiple immunofluorescence cytochemistry,mIFC）的实验方法,分析了SHP2、磷酸化SHP2（phospho-SHP2,pSHP2）和程序性死亡受体-配体1（programmed cell death-ligand 1,PD-L1）在KRAS突变型肺腺癌肿瘤细胞和免疫细胞的表达;多重免疫荧光细胞化学实验制定了两个分子标志物集合（pannel）:SHP2、CD4、CD8、CD68和CKs（panel 1）,以及CD8、PD-L1、程序性死亡受体-1（programmed cell death protein 1,PD-1）、T细胞免疫球蛋白粘蛋白3（T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3,TIM3）和CKs（panel 2）。结果第一部分:KRAS突变各亚型G12C、G12D和G12V的突变率分别为33.0%、20.9%和15.4%。生存分析结果显示,KRAS不同亚型的生存期无明显差别。对PD-L1的IHC染色结果分析发现,PD-L1的表达水平≥1%的患者占63.8%。进一步的亚组分析显示,KRAS G12C突变的肺腺癌PD-L1表达水平较非G12C突变的肺腺癌患者高。第二部分:该部分纳入了61例患者接受了免疫治疗的晚期KRAS突变型NSCLC。SHP2在32例患者的肿瘤细胞和免疫细胞中异质性表达,其中25例（78.1%）SHP2高表达（Hscore≥10）。SHP2与pSHP2的表达水平呈正相关。肿瘤组织间质成分SHP2（stromal SHP2,s-SHP2）在PD-L1≥50%的肿瘤组织中较高表达（P=0.039）。SHP2的表达在吸烟状态、KRAS突变亚型（G12C vs G12X vs其他）和共突变基因改变（KRAS+LKB1 vs KRAS+TP53 vs KRAS+CDKN2A/B vs KRAS）的患者中没有显著差异。通过mIFC分析,s-SHP2表达与间质区CD8、CD4、CD68和PD-L1水平呈正相关。高表达SHP2的患者占最佳疗效评价为部分缓解（partial response,PR）的100.0%,稳定（stable disease,SD）的80.0%,进展（progress disease,PD）的50.0%。SHP2高表达与较长的无进展生存期（progression-free survival,PFS）和总生存期（overall survival,OS）相关（P<0.001,P=0.013）,且SHP2和PD-L1均高表达的患者PFS较长（P<0.001）。结论PD-L1的表达水平在G12C和非G12C亚组存在差异,为进一步探索KRAS突变肺癌患者治疗疗效是否会受到不同突变亚型及PD-L1表达水平的影响提供了前期基础。在晚期KRAS突变型NSCLC患者中,SHP2高表达可以预测免疫治疗疗效和预后。SHP2可能同时在KRAS突变的肿瘤细胞和浸润性T细胞中发挥作用,这为进一步研究免疫微环境中SHP2多种潜在作用提供了依据。