桦褐孔菌属于一种真菌类药物,经研究发现,桦褐孔菌中含有大量的多糖,多糖有抑制肿瘤的生长、降血压降血糖、抗氧化等作用,桦褐孔菌多糖将会被广泛使用。本文研究的内容是对桦褐孔菌多糖的提取和纯化进行工艺优化,并通过体外细胞培养证明该药有抗肿瘤作用,并将纯化得到的精多糖制备缓释片,并且做质量评价。提取工艺:采用热水浸提方法,以蒸馏水作为溶剂,以多糖提取率作为考察指标,对提取的温度、时间、料液比以及提取次数作为考察因素,最优提取工艺条件为料液比1:20、提取温度95℃、提取时间2.25 h,提取次数1次。在此条件下,提高桦褐孔菌多糖的提取率。其制备工艺方法简单,易操作,符合制备要求。纯化工艺:(1)采用Sevage法清除多糖中蛋白质杂质,最佳工艺为正丁醇:氯仿=1:5,药物与溶剂的比例为4:1,转速为3000 r/min,转动20 min,静置20 min。(2)进一步采用大孔树脂吸附法除杂,筛选的工艺为多糖溶液上样量为70 mL,上样浓度为5 mg/mL,上样溶液pH为原溶液本身,流速为2 mL/min。洗脱液为50%乙醇,洗脱剂的量为90 mL,流速为2 mL/min。(3)采用透析方法,选用3000 D透析袋除去无机盐等小分子杂质。此工艺操作简便,能有效的去除多糖中的杂质,并得到纯度较高的精制桦褐孔菌多糖。体外抗肿瘤作用:选用胃癌SGC-7901肿瘤细胞,采用MTT法测定多糖对肿瘤细胞抑制效果,高、中、低剂量组24 h抑制率分别为25.52%、24.14%、8.56%,48 h抑制率分别为29.09%、28.24%、12.07%,与阳性对照组相比具有显著性差异,与阴性对照组相比中、高剂量组有显著性差异,证明桦褐孔菌多糖有抑制肿瘤的作用。缓释片的制备:将纯化后得到的精多糖作为主药制备缓释片,采用Box-Behnken星点设计试验对工艺进行处方优化,最佳优化处方为乙基纤维素用量为158.3 mg,填充剂用量为5.54%,黏合剂PEG用量为10.21%。此工艺方法可实施,达到设计要求。质量评价:体外质量评价从外观、硬度、稳定性、均一性和溶出度等因素进行评价。外观为深棕色,厚度均一,表面光滑;硬度范围在5-7 N左右;平均每片含有多糖57.4 mg;稳定性结果考察表明,在60℃高温、75%高湿和4000xL强光照射情况下对释放度没有任何影响;在92.5%的高湿的情况下对释放度有影响,应密闭保存。通过对缓释片的外观、硬度、含量测定、累计释放度以及稳定性的考察,建立质量评价的方法,该方法能有效控制多糖缓释片剂的质量。