【摘 要】
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目的研究SMARCAL1基因上调对Wnt通路的影响,以及对胚肾细胞增殖的影响,为探索Schimke免疫-骨发育不良疾病的肾脏发病机制提供基础。方法SMARCAL1片段与质粒重组经筛选测序,慢病毒包装并检测病毒滴度。选取来源人胚肾细胞的HEK293胚肾细胞作为实验对象,分为无处理空白对照组,转染空载慢病毒的阴性对照组和SMARCAL1过表达实验组。慢病毒转染HEK293胚肾细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳
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目的研究SMARCAL1基因上调对Wnt通路的影响,以及对胚肾细胞增殖的影响,为探索Schimke免疫-骨发育不良疾病的肾脏发病机制提供基础。方法SMARCAL1片段与质粒重组经筛选测序,慢病毒包装并检测病毒滴度。选取来源人胚肾细胞的HEK293胚肾细胞作为实验对象,分为无处理空白对照组,转染空载慢病毒的阴性对照组和SMARCAL1过表达实验组。慢病毒转染HEK293胚肾细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞株,观察荧光蛋白表达情况初步判断转染率。荧光定量PCR（qPCR）和Western Blot蛋白印迹法验证稳转细胞株中SMARCAL1表达情况。使用CCK-8和Ed U方法检测各组细胞增殖情况,最后通过荧光定量PCR检测各组细胞Wnt通路中信号因子的表达。结果测序结果显示重组质粒序列与SMARCAL1基因一致,检测SMARCAL1慢病毒滴度为1×108TU/m L。转染48小时后,在荧光显微镜下可见细胞核中绿色荧光表达,qPCR和Western Blot显示实验组胚肾细胞中SMARCAL1 mRNA和蛋白水平显著升高（P<0.05）,说明SMARCAL1过表达慢病毒载体在HEK293胚肾细胞中顺利表达。CCK-8和Ed U结果示SMARCAL1过表达后胚肾细胞增殖活力受到抑制,增殖速率下降（P<0.05）,经qPCR检测到Wnt通路中WNT4和下游CTNNB1基因在mRNA水平表达均降低（P<0.05）,阻碍Wnt通路激活,抑制Wnt靶基因转录。结论成功构建SMARCAL1过表达慢病毒载体并获得稳定转染胚肾细胞株。SMARCAL1上调后胚肾细胞增殖受抑,Wnt通路的WNT4和CTNNB1基因表达下降。说明SMARCAL1调控Wnt信号通路,影响胚肾细胞增殖,从而参与肾脏发育。
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目的神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是儿童最常见的颅外实体瘤,20-30%的NB患儿存在MYCN基因扩增,后者被证实与NB的恶性进展和患儿的不良预后密切相关。外泌体携带miRNAs在疾病进展过程中的调控作用被越来越多的研究关注。因此,本研究将探讨MYCN基因扩增的NB细胞来源的外泌体能否通过携带致癌miRNAs作用于非MYCN基因扩增的NB细胞,进而促进后者的增殖和迁移。方法使用实
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研究目的:非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是以肝脏脂质过度蓄积为主要特征的临床病理综合征,已成为目前患病率最高的慢性肝脏疾病之一。肝组织活检虽为NAFLD诊断金标准,但其为有创性检查,患者接受度低,因此目前急需开发灵敏度高、特异性好的无创性检查方法。外泌体的数量及内容物在不同疾病状态下改变,使其逐渐成为疾病诊断的生物标志物。目前已
目的:肥胖正在世界范围内广泛流行。预防和控制肥胖,已成为当前迫切需要解决的公共卫生问题。研究表明,与体质指数和腰围相比,体脂率（Body Fat Percentage,BF%）可以更精确的反应个体肥胖状况。肥胖的发生发展与DNA（Deoxyribonucleic acid）甲基化有关,而DNA甲基化受基因和环境因素共同影响。表型不一致同卵双生子（Monozygotic twins,MZ）拥有相同的
目的:通过检测血清中游离和降解单糖的组成,探索血清单糖在急性冠脉综合征患者（acute coronary disease,ACS）和健康对照者中的分布特征——即疾病“糖指纹”;探索血清单糖在急性心肌梗死患者中鉴别动脉狭窄严重程度的能力;比较血清游离葡萄糖/甘露糖比值（G/M）在ACS患者与健康对照者之间的差异,探索可用于评估疾病预后的指标。方法:2018年12月-2019年12月间诊断为急性冠脉综
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目的:本研究通过观察2型糖尿病肾病患者服用强肾汤后中医临床症状体征、空腹血糖、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白以及尿白蛋白排泄率的变化,评价强肾汤治疗2型糖尿病肾病的疗效及安全性,并探讨其作用机理。方法:本课题选取2017年9月至2019年7月临沂市中医医院肾病内科门诊和内分泌科门诊就诊的脾肾阳虚型糖尿病肾病的患者100例,将患者按随机数字表法（RAND BETWEEN函数法）抽样分为治疗组（n=50）
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