产超广谱β-内酰胺酶(extendedspectrumbeta-lactamases，ESBLs)是肠杆菌科细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制。该类酶可以水解青霉素类、一、二、三、四代头孢菌素和单环酰胺类抗生素，主要产生于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。产ESBLs耐药菌已在世界各地广泛流行，由于不同国家和地区之间抗生素使用的差异，产ESBLs细菌的基因型也不同。相关研究显示CTX-M型ESBLs在世界各地最为广泛流行。为了解深圳地区产CTX-M型ESBLs的流行状况，本课题对深圳市人民医院215株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的CTX-M型ESBLs的基因型分布进行了研究，并对产CTX-M型酶菌株的耐药性进行分析。 [方法] (1)收集我院2000年6月至2003年8月产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离菌株； (2)采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的ESBLs表型确证试验(纸片扩散法)筛选产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌； (3)应用碱裂解法提取产ESBLs菌的质粒DNA； (4)应用3组PCR引物分别扩增产酶菌株质粒DNA的CTX-M基因，扩增引物包括CTX-M-1组、CTX-M-2组和CTX-M-9组； (5)应用377测序仪对所有阳性的PCR产物进行双向DNA测序； (6)应用琼脂稀法检测所有产CTX-M菌株的最低抑菌浓度(MIC)。 [结果] (1)535株临床分离株共检出产ESBLs菌215株，总阳性率为40.2％。其中大肠埃希菌151株，肺炎克雷伯菌64株。 (2)215株产ESBLs菌株中有180株产CTX-M型ESBLs，阳性率为83.7％，其中143株为CTX-M-14型，12株为CTX-M-15型，9株为CTX-M-9型，5株为CTX-M-3型，4株为CTX-M-13型，4株同时产CTX-M-14与CTX-M-3，1株同时产CTX-M-14与CTX-M-15。在其中两株肺炎克雷伯菌中发现一种新基因型β-内酰胺酶，被命名为CTX-M-38。 (3)MIC结果显示：产CTX-M型ESBLs菌对亚胺培南100％敏感，阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为92.1％，头孢西丁和阿莫西林/克拉维酸的敏感率分别为65.8％和60.5％，环丙沙星的敏感率只有30.3％，氨苄西林/舒巴坦对其几乎没有抗菌作用，敏感率为0。在3、4代头孢菌素和氨曲南中，产CTX-M型ESBLs菌株对头孢噻肟的非敏感率高达88.2％，头孢他啶、氨曲南和头孢吡肟的耐药率较低(18.4％～36.8％)。 [结论] (1)深圳市人民医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率较高。 (2)深圳市人民医院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中以产CTX-M型酶为最常见，其中主要为CTX-M-14，产该类酶的细菌已在医院内广泛流行。CTX-M-38是一种新基因型，GenBank登记号为(AY822595)。 (3)产CTX-M型ESBLs菌对亚胺培南100％敏感，对其它抗生素均有不同程度耐药。