崇明水仙试管成球及离体脱毒技术研究

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崇明水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)是上海市的特有花卉品种之一,具有悠久的栽培历史。但目前生产上分球是唯一的繁殖方式,增殖系数低,且病毒积累,造成种性退化,产量降低,阻碍其产业发展。本研究对影响崇明水仙试管球诱导和增殖的多种因素进行了探讨,建立了试管球高效诱导体系和高频增殖体系;采用DHT+高温处理、DHT+病毒唑处理等技术手段进行了离体脱毒研究。主要结果如下:1.以带鳞茎盘的鳞片为外植体时,离体诱导前应对鳞茎进行4周的冷处理。2.将鳞茎盘切成4块,在1000mg/L头孢拉定溶液中浸泡3h,污染率降至8.3%。3.适合花序轴诱导试管球的最佳培养基为MS+BA10mg/L+NAA5mg/L+蔗糖30g/L,有效诱导率达到171.3%。适合带鳞茎盘的鳞片诱导试管球的最佳培养基为MS+BA1mg/L+NAA1mg/L+蔗糖30g/L,成球率为163.6%。4.冷处理3周的内层鳞片是诱导愈伤的最佳材料,在MS+BA1mg/L+2,4-D0.1mg/L+蔗糖30g/L培养基上,诱导率和再分化率分别为48.4%和23.3%。子房愈伤诱导和再分化的最佳培养基为MS+BA10mg/L+NAA3mg/L+蔗糖30g/L,诱导率和再分化率分别为51.9%和22.2%。5.试管球增殖的最佳培养基为MS+BA5mg/L+NAA1mg/L+蔗糖40g/L,增殖率为175.0%。适当提高蔗糖浓度以40g/L为宜,AC显著降低试管球的增殖率。6.适合试管球生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+AC1g/L+蔗糖30g/L,生根率为90.4%。AC有利于提高试管球的生根率。7.利用DHT+高温处理后病毒含量明显降低。DHT30mg/L+病毒唑30mg/L处理能使NMAV含量降低到极微弱的水平,且不影响试管球存活;DHT10mg/L+病毒唑10mg/L处理可以完全脱除NDV和NCLV病毒,脱毒效果通过RT-PCR技术检验证实。
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