心肌重构是常见于各种心血管疾病中的重要生理病理变化，在此过程中，心脏由代偿性肥厚发展为失代偿、并最后发展为心衰。它可由各种环境因素如心肌机械张力、心肌缺血和血液荷尔蒙及细胞因子浓度改变以及多种遗传缺陷诱导发生，并通过改变内源性基因的表达和蛋白功能实现。因此我们希望能够通过研究LaminA/C基因Glu82Lys致扩张型心肌病突变以及在小鼠中敲除CARP和CARK基因的表达，探讨心肌肥厚的发生机制。 LaminA/C基因Glu82Lys突变是我们实验室发现的一个致扩张型心肌病恶性突变，在本文第一部分工作中，我们体外构建了该基因的突变体，通过转染HEK293细胞，对改突变导致心肌扩张的机理进行了研究。我们的实验结果显示，Glu82Lys突变改变了LaminA/C蛋白及其相互作用蛋白emerin在细胞核膜的正常定位，由原来的主要分布于细胞核膜改变为弥散分布于整个核区。突变蛋白的表达使得细胞核膜的正常结构被破坏，细胞膜变得脆弱易碎。同时染色质异质化程度增加，染色质凝集异常。在双氧水诱导刺激下，LaminA/C基因Glu82Lys突变增加细胞凋亡发生率。 CARP和CARK基因是我院从主动脉心脏文库中克隆的两个新基因。前期研究结果显示CARP基因可以抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。在培养的新生大鼠心肌细胞中高表达可以抑制肾上腺素诱发的心肌细胞肥厚。提示CARP可能是心肌肥厚的抑制因子。CARK基因特异表达于心肌组织，它的人类同源基因TNNI3K可与肌钙蛋白Ⅰ相互作用，提示它可能参与调节心肌细胞收缩功能。我们早前的研究结果表明，在小鼠心脏中高表达CARK可以促进心肌肥厚发生，提示CARK是心脏特异的心肌肥厚相关基因。本文第二部分工作旨在通过建立这两个基因的基因敲除小鼠模型，研究它们在心血管系统的发生、发育和正常功能维持中所起的作用，以及与心肌重构的关系。我们构建了两个基因的基因敲除载体，转染小鼠ES细胞后，筛选得到了它们的阳性重组克隆。将重组ES细胞注射入小鼠囊胚后，得到了这两个基因的嵌合体小鼠。由于学制所限，目前该部分工作尚远未完成，因此，本文第二部分仅仅是该课题的一个阶段性小结。