WOXs调控种子萌发活力的初步研究

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种子休眠是植物适应外在环境变化而形成的一种适应性机制,种子休眠与种子萌发密切相关,在植物的生长发育过程中发挥重要的作用。种子萌发活力是种子活力的一项重要生物学指标,对种子萌发活力的研究是基础理论和农业实践的需要。  本课题旨在研究WUSHEL-RELATED HOMEOBOX(WOX)家族基因在种子萌发过程中发挥的作用。以拟南芥T-DNA插入突变体wox2和wox5为实验材料,利用遗传学和分子生物学方法对WOX2和WOX5基因调控种子萌发速率机制进行了初步探究。本研究发现与野生型Col相比,wox2种子萌发速率减缓,wox5种子萌发速率加快。同时qRT-PCR结果分析发现,在种子萌发过程中WOX2和WOX5基因的表达量均呈现下降趋势。对pWOX5:WOX5-GFP转基因材料进行荧光信号分析发现,在种子萌发初期,WOX5-GFP的荧光信号较强,随着种子的萌发,WOX5-GFP的荧光信号减弱。Western-blot实验结果显示,随着种子的萌发,种子中WOX5蛋白表达量下降。以上结果表明WOX2和WOX5对种子的萌发速率可能分别起到正调控和负调控作用。  qRT-PCR结果显示,与野生型Col相比,wox2和wox5种子在萌发过程中CYCD1;1、CYCD2;1和CYCD4;1基因的表达量发生明显变化。对CYCD1;1、CYCD2;1和CYCD4;1基因ATG上游2Kb序列分析后发现,CYCD相关基因存在多个与WOX家族或者ERF家族蛋白结合的WOX、AP2元件。相关研究已知CYCD1;1、CYCD2;1和CYCD4;1在种子萌发过程中发挥重要的作用,因此本课题推测在种子萌发过程中CYCD1;1、CYCD2;1和CYCD4;1可能是WOX2和WOX5的下游靶基因。
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