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目的:慢性乙型肝炎相关的慢加急性肝衰竭(Acute-on-chronic hepatitis B liver failure,ACHBLF)因病情发展快,恶化迅速,病死率高,成为影响慢乙肝(Chronic hepatitis B,CHB)患者生存质量的重要因素;目前对于ACHBLF的发病原因以及疾病由CHB到ACHBLF前期(pre-ACHBLF)最终发展至ACHBLF过程中影响因素尚不清楚。其中免疫细胞的变化以及介导的肝损伤是影响ACHBLF病人预后的重要因素,同时许多新发现的免疫细胞在ACHBLF中的作用还有待研究,因此本课题通过综合性分析pre-ACHBLF与ACHBLF患者多种免疫细胞的变化,以及免疫细胞与临床指标的相关性,探究细胞免疫在ACHBLF发展过程中的作用,为ACHBLF的早期发现和治疗寻找潜在靶点和新的思路。方法:选取2017年8月-2019年5月于石家庄市第五医院接受治疗的27例ACHBLF患者,15例pre-ACHBLF患者作为病例组;并选择CHB患者22例,健康人(Health control,HC)26例作为对照组。收集患者临床资料、肝功能、血常规指标,并采集所有研究对象外周血分离,通过流式细胞仪检测辅助性T细胞(T helper cell,Th),Th1、Th9、Th17,调节性T细胞(Regulatory T cell,Tregs),细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cell,Tc),Tc1、Tc9、Tc17和髓系抑制性细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)及其亚型的频数,分析其与肝功能指标、炎症指标之间的相关性,使用SPSS 21.0对结果进行统计分析。结果:1.Pre-ACHBLF(11.11%,P=0.032)和ACHBLF组(9.02%,P=0.002)Th1细胞的频数明显低于HC组(18.58%),其他各组间差异无统计学意义。pre-ACHBLF组Th9细胞的频数(0.77%)明显低于HC组(2.33%,P=0.040),而Th17细胞在pre-ACHBLF组(6.40%)高于CHB组(1.63%,P=0.002)与HC组(3.00%,P=0.025),ACHBLF组(4.03%)的Th17细胞也高于CHB组(P=0.007),其余各组间差异无统计学意义。2. Pre-ACHBLF患者Th9细胞频数与ALT(r=-0.638,P=0.042)、TP(r=-0.733,P=0.025)、GLB(r=-0.817,P=0.007)、IBIL(r=-0.717,P=0.030)、APTT(r=-0.700,P=0.036)负相关,而与ALB/GLB(r=0.748,P=0.020)正相关;Th17细胞频数与IBIL(r=-0.750,P=0.020)负相关。ACHBLF患者各T细胞亚群与肝功能指标无相关性。3. Pre-ACHBLF患者Th9细胞频数与淋巴细胞负相关(r=-0.828,P=0.006),而与PLR正相关(r=0.783,P=0.013)。ACHBLF患者Th1细胞频数与血小板正相关(r=0.761,P=0.003),与RPR(r=-0.753,P=0.003)、MPR(r=-0.611,P=0.046)负相关。4. Pre-ACHBLF组Tc9细胞(0.86%)明显低于HC组(4.46%,P=0.027),而Tc17细胞在ACHBLF组(5.37%)和pre-ACHBLF组(5.23%)高于CHB组(0.89%,P<0.001)和HC组(2.24%,P<0.05)。Tc1细胞频数在四组间差异无统计学意义(28.90%vs 18.27%vs 20.91%vs20.64%,F=1.048,P=0.381)。5. Pre-ACHBLF组患者Tc9细胞频数与ALT(r=-0.783,P=0.013)、AST(r=-0.717,P=0.030)、GLB(r=-0.683,P=0.042)、IBIL(r=-0.683,P=0.042)、APTT(r=-0.750,P=0.020)负相关;Tc17细胞频数与TBIL(r=-0.750,P=0.020)负相关。ACHBLF组患者外周血Tc细胞频数与肝功能指标无相关性。6. Pre-ACHBLF组患者Tc9细胞频数与血小板(r=0.667,P=0.050)、PLR(r=0.833,P=0.005)正相关,与淋巴细胞(r=-0.828,P=0.006)负相关,Tc17细胞与淋巴细胞(r=-0.795,P=0.010)负相关;ACHBLF组患者外周血Tc1细胞频数与血小板(r=0.626,P=0.022)正相关,与RPR(r=-0.599,P=0.031)负相关。7. Pre-ACHBLF组(1.74%)和ACHBLF组(1.91%)Tregs频数高于CHB组(0.60%,P<0.05)和HC组(0.55%,P<0.05),而Th17/Tregs比值在四组间差异无统计学意义(4.80 vs 2.99 vs 3.48 vs 2.11,χ~2=3.817,P=0.282)。8. Pre-ACHBLF组患者Th17/Tregs与AST(r=-0.746,P=0.033)、APTT(r=-0.938,P=0.001)负相关;ACHBLF组患者Tregs频数与、、PT(r=0.605,P=0.037)、TT(r=0.621,P=0.031)、INR(r=0.604,P=0.037)正相关,与PTA(r=-0.642,P=0.025)负相关;Th17/Tregs与AST(r=-0.773,P=0.005)、TBIL(r=-0.809,P=0.003)、DBIL(r=-0.700,P=0.016)、IBIL(r=-0.827,P=0.002)、PT(r=-0.773,P=0.005)、TT(r=-0.868,P=0.001)、INR(r=-0.755,P=0.007)、APTT(r=-0.791,P=0.004)负相关,与PTA(r=0.827,P=0.002)正相关。9. Pre-ACHBLF组(5.10%)和ACHBLF组(2.81%)的MDSCs频数高于CHB组(1.24%,P<0.001)和HC组(1.04%,P<0.001),pre-ACHBLF组(0.19%)、ACHBLF组(0.23%)和CHB组(0.11%)的PMN-MDSCs频数均高于HC组(0.05%,P<0.001)。M-MDSCs频数在四组间差异无统计学意义(0.40%vs 0.26%vs 0.97%vs 0.64%,χ~2=4.514,P=0.211)。10. Pre-ACHBLF组MDSCs与ALT(r=0.643,P=0.010)、AST(r=0.664,P=0.007)、TBIL(r=0.614,P=0.015)、DBIL(r=0.807,P=0.000)、IBIL(r=0.793,P=0.007)、APTT(r=0.661,P<0.001)呈正相关,与PTA(r=-0.639,P=0.010)呈负相关;与中性粒细胞数(r=0.727,P=0.002)、单核细胞数(r=0.767,P=0.001)、NLR(r=0.571,P=0.026)、MLR)(r=0.786,P=0.001、SIRS(r=0.846,P<0.001)呈正相关;ACHBLF组MDSCs与TBIL(r=0.545,P=0.003)、DBIL(r=0.530,P=0.004)呈正相关,与淋巴细胞计数呈负相关(r=-0.435,P=0.023)。结论:1.Pre-ACHBLF组与ACHBLF组患者外周血Th1、Th9、Tc9细胞减少,Th17与Tc17细胞升高,且与临床指标有相关性,说明效应性T细胞的变化与ACHBLF的发生发展有关。2.抑制性细胞Tregs与MDSCs在Pre-ACHBLF与ACHBLF患者明显增高,且与临床指标具有相关性,说明Tregs与MDSCs可能是影响ACHBLF疾病进展的重要因素。3.多种免疫细胞间相互作用影响着ACHBLF的发生发展,完善了ACHBLF免疫学发病机制。