随着生物科技水平的日益提升,抗生素的量产得以实现。抗生素在医疗、畜禽和水产养殖业等行业中起着不可替代的作用,但因抗生素本身的选择性作用,会造成诱导细菌耐药性增强,使得灭菌处理办法失效,最终损害公众身体健康,增加社会的经济负担。本文以庆大霉素为例,对菌渣、土壤和植物样品中庆大霉素残留量分析的样品前处理技术、检测方法等进行了研究,分别建立了菌渣、土壤和植物基质中样品前处理方法,固相萃取-超高效液相色谱-串联二级质谱（SPE-UPLC-MS/MS）分析方法以及固相萃取-超高效液相色谱-蒸发光散射（SPE-UPLC-ELSD）检测分析方法。样品前处理方法简便、准确,方法回收率与精密度良好,具有很好的选择性和重现性,适用于庆大霉素以及氨基糖苷类抗生素残留的分析。本文分别建立了含庆大霉素菌渣、土壤和植物的样品前处理方法。样品前处理中包括提取和纯化两个过程。在样品的提取过程中,分别对菌渣、土壤和植物样品的提取剂种类和浓度,辅助提取的方式、时间以及次数,样品基质用量等参数进行优化选择,以庆大霉素回收率为衡量指标,得出最佳提取条件为:菌渣样品的最佳提取剂5%的三氯乙酸（含2 mmol/L的EDTA）:乙腈=8:2（v/v）;植物样品的最佳提取剂为5%三氯乙酸（含1 mmol/L的EDTA）;土壤样品的最佳提取剂为0.5 mol/L Na₂CO₃,以超声提取为辅助提取方式,提取最佳时间为20 min,提取2次,样品基质用量为10 mL/g。在提取液纯化的过程中,采用固相萃取方法,分别对固相萃取柱类型、淋洗液种类、浓度和pH、洗脱液种类和体积等条件参数进行优化和选择,以庆大霉素回收率为衡量指标,当以MCX柱为固相萃取柱,5 mL的0.1 mol/L（pH=8）的磷酸盐缓冲溶液为淋洗液,10mL 10%氨水甲醇溶液为洗脱液时,庆大霉素回收率最高。基于超高效液相色谱-串联二级质谱（UPLC-MS/MS）建立了庆大霉素残留量的检测方法。通过对色谱柱类型的选择、流动相种类的选择、流动相比例的调整以及锥孔电压、毛细管电压等质谱参数的选择和优化等,对庆大霉素各C组分进行定性定量分析检测。结果表明,菌渣、土壤和植物中庆大霉素各组分加标回收率均在80%左右,日内日间精密度符合要求,其中庆大霉素的线性范围是36³065μg/kg,方法检测限（LOD）为1.16-6.86μg/L,定量限（LOQ）为3.86-22.86μg/L,在线性范围内线性良好,R²值均在0.99以上。此外,本文又基于超高效液相色谱-蒸发光散射（UPLC-ELSD）建立了庆大霉素残留量的检测方法。通过对色谱柱类型的选择、流动相种类的选择、流动相比例、柱温以及蒸发温度,喷雾器温度等检测器参数的选择和优化等,对庆大霉素各C组分进行定性定量分析检测。其中庆大霉素在1.58²78μg/mL内线性范围良好,LOD为1.185-2.385μg/mL,LOQ为3.658-7.362μg/mL。基于UPLC-ELSD检测庆大霉素的方法基础上,建立链霉素和大观霉素的UPLC-ELSD残留量检测方法。通过对色谱条件和检测器条件的调整,最后采用梯度洗脱的方式对链霉素和大观霉素进行定性定量检测。其中链霉素的线性范围是10-1000μg/mL,线性方程为y=0.9138x+1.412,该方法的LOD为0.312μg/mL,LOQ为1.25μg/mL;大观霉素的线性范围是10-1000μg/mL,线性方程为y=0.9239x+1.0283,该方法的LOD为1.304μg/mL,LOQ为4.35μg/mL;R²值均在0.99以上。