亚胺硫磷农药残留酶联免疫检测方法的研究

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论文对有机磷农药亚胺硫磷的免疫分析方法进行了深入系统的研究,合成出亚胺硫磷的半抗原,研究了半抗原与载体蛋白结合的方法,制备了高效价和高灵敏度的亚胺硫磷多克隆抗体。通过对免疫分析形式与免疫分析的特异性、灵敏性以及食品中干扰物对酶联免疫分析方法影响的研究,建立了一种简便、快捷、实用的亚胺硫磷免疫分析方法——直接竞争酶联免疫检测方法。此法灵敏度较高,IC50=20.00±0.20μg/kg,IC15=0.60±0.016μg/kg,交叉反应研究表明对于有机磷农药有着较好的特异性。在方法的应用研究中,由于亚胺硫磷广泛存在于水果蔬菜中,选取苹果、桃子、甘蓝、黄瓜、苹果汁、橙汁作为研究对象考查了它们的基质影响及其去除方法。经过甲醇提取固体样品,简单的稀释后可消除基质影响,液体样品则直接用PBS稀释后可消除基质影响。在方法的准确性实验中,在三个加标水平上,直接竞争酶联免疫方法的回收率在78~102.3%,变异系数低于13.6%。由于抗体灵敏度高,前处理方法简单,方法检出限均远远低于样品的最大残留限量值(MRL),为实际样品的检测提供了较好的基础。通过高效液相色谱检测方法,对建立的亚胺硫磷直接竞争酶联免疫检测方法的准确性进行了验证。两种方法检测结果具有较高的相关性,线性相关系数R2值为0.9849,表明新开发的酶联免疫检测方法以及简单、快速、有效的前处理方法在农产品中亚胺硫磷的检测中是可信的,该检测体系可用于亚胺硫磷的大量样品的快速现场检测。
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