细菌内毒素（Lipopolysaccharide,LPS）是革兰氏阴性菌裂解后的产物,为外源性“热原”,可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。传统的内毒素检测方法鲎试验法存在假阳性和大量捕杀鲎导致环境破坏的缺陷,因此需要开发灵敏特异和环境友好的内毒素检测方法。本论文选取对LPS特异识别的内源蛋白或多肽构建识别元件,荧光蛋白对m Turquoise/m Neon Green作为报告元件,构建荧光共振能量转移（FRET）蛋白质传感器,实现对LPS的灵敏、特异和快速检测。本研究主要包括以下四个方面:基于内毒素结合肽（LPS-binding peptide,LBP）检测LPS的FRET生物传感器构建。本研究将FRET供体m Turquoise和受体m Neon Green基因序列与对内毒素特异性识别的内毒素结合肽基因序列融合,构建重组载体p PIC9k-LBP-m Neon Green和p PIC9k-LBP-m Turquoise,转化进入毕氏酵母GS115,使用毕氏酵母表达重组蛋白LBP-m Turquoise和LBP-m Neon Green,对重组蛋白的生化性质和光谱特性进行鉴定。基于内毒素结合肽FRET传感器检测LPS。首先优化检测体系的供体模块和受体模块的浓度比例,然后使用最优比例对LPS标准品检测,确定线性关系范围10 ng/m L-200 ng/m L,线性方程为Y=0.09834 log CLPS+0.08543（R~2=0.99）,检测限为2.03 ng/m L。并对检测体系中可能存在的干扰物质进行检测,探究体系的选择性。最后基于内毒素结合肽FRET传感器用于环境水样品的内毒素检测,与鲎试验方法检测值比较,评估基于内毒素结合肽FRET传感器的可靠性,并且内毒素结合肽FRET传感器能很好区分革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌。基于人源Toll样受体4（TLR4）和髓样分化蛋白2（MD2）的FRET蛋白质传感器的构建。本方法利用LPS能特异性引发MD2-TLR4形成双拷贝四聚体复合物的特性,将FRET供体m Turquoise和受体m Neon Green基因序列与对内毒素特异性识别的MD2-TLR4基因序列融合,构建重组载体p PIC9k-md2-toll4-m Turquoise和p PIC9k-md2-toll4-m Neon Green,转化毕氏酵母GS115,使用毕氏酵母表达重组蛋白MD2-TLR4-m Turquoise和MD2-TLR4-m Neon Green,对重组蛋白的生化性质和光谱特性进行鉴定。基于人源Toll4样受体4（TLR4）和髓样分化蛋白2（MD2）的FRET蛋白质传感器检测LPS。首先优化检测体系的供体模块和受体模块的浓度比例,然后使用最优比例对LPS标准品检测,确定线性关系范围为10 ng/m L-100 ng/m L,线性方程Y=0.01625 log CLPS+0.19118（R~2=0.98）,检测限为3.24 ng/m L,并对检测体系中可能存在的干扰物质进行检测,探究体系的选择性。最后基于MD2-TLR4 FRET传感器用于环境水样品的内毒素检测,与鲎试验方法检测值比较,评估基于MD2-TLR4 FRET传感器的可靠性,并且该FRET传感器能很好区分革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌。