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目的：自第一只克隆羊诞生以后,牛,羊,猫,鼠,驴,马,狗等动物也都被相继克隆出来,然而体细胞核移植技术生产的克隆动物其成功率低,这与表观遗传异常有一定关联,这其中就包括组蛋白乙酰化的异常。通过组蛋白去乙酰化抑制剂,可以改变表观遗传状态,从而进一步提高体细胞克隆胚胎的发育潜能。LBH589, CUDC-101, PXD101,已经有研究证明这三种去乙酰化抑制剂可以提高组蛋白乙酰化水平,但是在体细胞克隆胚胎方面至今还未有人使用。本研究是首次使用这三种去乙酰化抑制剂探究其对猪SCNT胚胎的影响。方法：利用不同浓度的组蛋白去乙酰化抑制剂(LBH589, CUDC-101and PXD101)处理猪体细胞克隆胚胎24小时,寻找最适合浓度,随后用最适浓度处理不同时间。确定好最佳时间和最佳浓度后,进行免疫荧光染色观察胚胎乙酰化水平。在每种药品处理之后,将胚胎通过胚胎移植移入代孕母猪体内,观察其妊娠情况。结果：(1)在体外发育的胚胎给予不同浓度的LBH589处理,观察各浓度对于胚胎发育能力的影响。结果显示,经50nM的LBH589处理24h的胚胎与对照组以及5,500nM处理组相比,其囊胚率明显提高(32.4%vs.11.8%,12.1%,and10.0%, respectively, P<0.05)。用50nM的LBH589处理重构胚不同的时间,并在处理后使用6-DMAP激活胚胎。结果可知,经24h处理的胚胎,囊胚率高于其他组别。对用LBH589处理6h的胚胎使用H4K12抗体进行免疫荧光染色。结果显示,经LBH589处理后的胚胎,其荧光强度强于其他组别。对LBH589处理的胚胎以及未经处理胚胎进行胚胎移植,移植到代孕母猪体内。结果显示,经药物处理以及未经药物处理的胚胎移植成功率分别为100%和66.7%。综上所述,LBH589可以通过改变表观遗传状态来提高SCNT胚胎的发育潜力以及重编程的能力,并能增加囊胚的质量。(2)发现对猪SCNT胚胎使用1μM的CUDU-101处理24h,可以明显提高胚胎的发育能力(18.5%vs.10.3%,P<0.05)。为了进一步评价其体内发育力,将使用CUDU-101处理的胚胎进行胚胎移植到两头代孕母猪体内,结果显示一头母猪妊娠且怀有6个胎儿。对经药物处理以及未经药物处理的胚胎分别进行了H3K9组蛋白乙酰化水平的研究。结果显示,在1细胞期,未经CUDU-101处理的胚胎其乙酰化水平明显低于经CUDU-101处理的胚胎。综上所述,CUDU-101可以显著提高猪SCNT胚胎体内及体外核重编程的发育能力。(3)经0.5μM的PXDIOI处理的胚胎其囊胚率较对照组相比有明显提高(23.3%vs.11.5%, P<0.05)。随后,使用0.5μM的PXDIOI分别对胚胎处理不同的时间。结果显示,处理24h的组别其囊胚率明显高于对照组(25.7%vs.10.6%,P<0.05)。将使用PXD101处理的胚胎进行胚胎移植到两头代孕母猪体内,结果显示一头妊娠且怀有4个胎儿。在探究PXD101对胚胎乙酰化水平影响的实验中,实验结果显示,经PXDIOI处理的组别,在1细胞期和2细胞期,胚胎H3K9和H4K12的荧光强度明显高于对照组。综上所述,PXDIOI可以显著提高猪SCNT胚胎体内及体外的发育力,且可以提高其核重编程能力。结论：(1)使用LBH589处理胚胎24h可以显著提高猪胚胎的体外成熟率；(2)浓度为1μM的CUDC-101处理胚胎24h可以显著提高猪的体外成熟发育率(3)使用为0.5gM的PXD101处理24h可以明显提高猪胚胎体外发育成熟率