南瓜籽,又名白瓜子、南瓜仁等,是葫芦科植物—南瓜的成熟种子。南瓜在我国有大量种植,因此南瓜籽资源尤为丰富。南瓜籽营养价值很高,具有降低胆固醇、抗氧化、抗炎以及医治前列腺疾病等作用,植物甾醇是南瓜籽主要的活性成分之一,现在因其功能突出,受到越来越多研究者的重视。为了提高南瓜籽甾醇的提取效率和纯度,并探究其治疗前列腺癌的作用,本论文对南瓜籽甾醇的提取、分离纯化工艺进行了优化,用GC-MS对其组分进行了分析以及通过前列腺癌细胞结晶紫试验对其功能进行了评价。1.超声波辅助萃取南瓜籽总甾醇工艺的优化采用超声波萃取法提取南瓜籽总甾醇,比较了无水乙醇、石油醚、乙酸乙酯和正己烷对总甾醇的提取效果,考察了一系列因素,设计正交试验。最终选择乙酸乙酯作为提取溶剂,确定最佳提取工艺为:料液比1:16,超声40 min,用0.5 mol/L的KOH皂化0.5 h,各个因素主次顺序为:超声时间>皂化时间>料液比>KOH浓度,其中,超声时间具有显著性差异。通过三次验证试验,用乙酸酐-浓硫酸法测得南瓜籽总甾醇为0.56%,基本符合单因素试验的结果。2.采用硅胶柱层析法对南瓜籽甾醇进行纯化以超声波提取的南瓜籽甾醇为原料,选用硅胶柱层析法来对其进行纯化。在考察了最佳洗脱剂和上样量后,得出柱层析最优的纯化工艺为:上样18 mg总甾醇,以石油醚:乙酸乙酯=8:2(V:V)洗脱,经薄层层析和HPLC检测后,纯化后的样品中,总甾醇含量为39.80%,比纯化前的3.0%提高了13.27倍。3.南瓜籽纯化样品的组分分析及功能评价采用结晶紫试验探究其对前列腺癌细胞的生长的影响,结果纯化样品浓度为65.58μg/mL时对PC3癌细胞有明显的抑制作用,浓度为21.86μg/mL时对DU145癌细胞有抑制作用。用GC-MS对纯化的样品进行分析,其主要组分是油酸和植物甾醇,其中,植物甾醇主要有麦角甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇和胆甾烯醇。