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为了更好地在多变的环境中生存,细菌体内逐渐进化出了多种不同的信号调控机制。吲哚作为一种重要的信号分子,对于细菌的多种生理生化行为均具有调控作用,但调控机制目前尚未明确。因此,找到参与吲哚信号调控通路中的关键蛋白以及吲哚的响应机制对于丰富复杂的吲哚调控网络、获取对吲哚调控机制的认知均具有重要的科学意义。本研究选择水稻优势内生菌成团泛菌YS19及受吲哚信号负调控的YS19突变株△cytR作为对象,探究了cytR基因突变对YS19抗逆生存能力的调控。研究发现,当cytR基因发生突变后,菌体在不同逆境下的生存适应性均受到了影响。突变株生物薄膜形成能力降低,不利于对重金属Zn、酸以及四环素的抗性能力。此外,cytR的突变也导致菌体在硫饥饿的环境中的存活能力下降。在不含硫元素的M9培养基中,ΔcytR的存活率相比野生株降低了18.6%;外源添加吲哚后,野生株的存活率下降了16.6%,与ΔcytR存活率相当;而对于△cytR突变株,添加吲哚与不添加吲哚组的存活率分别为39.13%和42.63%,可见外源吲哚的添加对其存活能力的影响并不大,这说明,cytR在吲哚信号的传导中起着重要的作用,即吲哚对YS19抗硫饥饿的调控是通过cytR来实现的。上述研究表明,cytR对YS19的生存适应性具有非常重要的调控作用。为了找到cytR下游与抗逆相关的基因,通过对YS19与△cytR的全细胞蛋白进行分析,SDS-PAGE发现一条差异蛋白带,介于17-26 k D之间,该蛋白只在野生株中表达,是cytR的下游蛋白且受Cyt R的正调控作用。切割差异蛋白质胶条进行质谱鉴定,在鉴定结果中发现六个分子量几乎一致的疑似下游蛋白,且这些蛋白都与菌体的抗逆相关。利用q PCR技术证实了在转录水平上这些蛋白确实均受Cyt R的正调控。而既然吲哚对cytR存在负调控作用,而cytR基因又参与众多菌体的抗逆调控,细菌如何感知吲哚成为一个问题。因此我们研究了吲哚对cytR启动子的调控作用,通过将cytR启动子连接GFP报告基因构建重组质粒,发现吲哚对cytR启动子也存在负调控,此外,由于Cyt R是胞苷抑制子,我们还考察了胞苷对其启动子的调节,发现二者对cytR启动子的调控具有交互性,即,同时添加吲哚和胞苷后,二者对cytR启动子的调控非单纯的叠加。基于此我们提出了一种Cyt R启动子感受吲哚发挥抗逆作用的模型,并以四环素和硫饥饿两种逆境因子对模型进行了验证。以上现象说明细菌对吲哚的响应很可能发生在转录水平上。本研究探讨了吲哚响应基因cytR在DNA转录水平上受吲哚的调控作用,不仅丰富了cytR基因对YS19多种生理行为的调控认识,也初步获得了吲哚调控通路当中的几种疑似新基因以及菌体对吲哚的响应模式,获得了对cytR和吲哚调控通路的新认识。