广西莪术三个优良种质的组织培养研究及挥发油测定

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dongmeizi1988
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目的:利用组织培养方法对广西莪术三个优良种质进行快速繁殖,筛选出各阶段最适培养基,为广西莪术优良种质的组织培养研究提供实验依据和理论基础;利用GC-MS法同时对广西莪术三个优良种质组培苗种植收获的药材(以下简称组培苗药材)与原种质块茎繁殖收获的药材(以下简称原药材)的挥发油成分进行测定分析,比较两者之间的差异,考察组培苗药材质量,为广西莪术优良种质组培苗药材的挥发油成分研究提供实验依据。方法:1、本研究利用组织培养的方法,对广西莪术三个优良种质进行快速繁殖,对不定芽诱导、继代、丛生芽增殖、壮苗及生根等阶段培养基进行筛选,筛选出各阶段最适培养基;2、利用GC-MS法同时对广西莪术三个优良种质组培苗药材与原药材的挥发油成分进行测定分析,比较两者之间的差异。结果:1、广西莪术优良种质A28(高油型)不定芽诱导最适培养基是:MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L,诱导率为83.3%;继代最适培养基是:MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L,增值系数为2.3;丛生芽增殖最适培养基是:MS+6-BA3.0mg/L+蔗糖30g/L;壮苗最适培养基是:MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+蔗糖30g/L,增值系数为2.0;生根最适培养基是:1/2MS+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L,平均生根数为11.3。2、广西莪术优良种质玉3/B3(高油高产型)不定芽诱导最适培养基是:MS+KT1.0mg/L+蔗糖30g/L,诱导率为76.7%;继代最适培养基是:MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L,增值系数为2.2;丛生芽增殖最适培养基是:MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖25g/L;壮苗最适培养基是:MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+蔗糖30g/L,增值系数为3.1;生根最适培养基是:1/2MS+NAA0.4mg/L+蔗糖30g/L,平均生根数为7.1。3、广西莪术优良种质C84(高产型)不定芽诱导最适培养基是:MS+KT1.0mg/L+蔗糖30g/L,诱导率为70.0%;继代最适培养基是:MS+6-BA4.0mg/L+蔗糖30g/L,增值系数为3.2;丛生芽增殖最适培养基是:MS+6-BA3.0mg/L+蔗糖30g/L;壮苗最适培养基是:MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.6mg/L+蔗糖30g/L,增值系数为2.7;生根最适培养基是:1/2MS+NAA0.4mg/L+蔗糖30g/L,平均生根数为8.8。4、广西莪术三个优良种质的组培苗移栽成活率均达90%以上,将移栽成活的组培苗与原种质的根茎同时种植大田,收获后比较平均单株产量,组培苗药材莪术鲜重低于原药材,但郁金鲜重明显高于原药材。5、GC-MS法测定挥发油成分:A28原药材与A28组培苗药材共有24种化学成分相同。在原药材及组培苗药材中相对含量均高的化合物是莪二酮,莪二酮在原药材中相对含量38.66%,在组培苗药材中相对含量高达42.75%。6、玉3/B3原药材与玉3/B3组培苗药材共有21种化学成分相同,相对含量高的化合物是2-环己烯-1-酮,2-环己烯-1-酮在原药材中相对含量59.60%,在玉3/B3组培苗药材中相对含量42.19%。7、C84原药材与C84组培苗药材共有18种化学成分相同,相对含量高的化合物是2-环己烯-1-酮,2-环己烯-1-酮在C84原药材中相对含量高达61.19%,在C84组培苗药材中相对含量50.66%。结论:本研究利用组织培养的方法筛选出了广西莪术三个优良种质的不定芽诱导、继代、丛生芽增殖、壮苗及生根等阶段的最适培养基;组培苗移栽成活率很高,将移栽成活的组培苗与原种质根茎同时种植实验地后,收获的组培苗药材平均单株莪术鲜重低于原药材,平均单株郁金鲜重明显高于原药材;利用GC-MS法同时对广西莪术三个优良种质组培苗药材与原药材的挥发油成分进行测定分析,组培苗药材与原药材挥发油成分大部分相同,组培苗药材基本保持了原药材的优良性状。
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