α-水芹烯及壬醛对番茄圆弧青霉和灰霉的抑菌作用研究

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青霉病和灰霉病是番茄果实采后的主要病害,由病原菌圆弧青霉和灰霉所引起,目前,防控的手段主要依靠传统的化学杀菌。虽然传统化学杀菌剂具有较好的防治效果,但存在毒性大、高污染且长期使用易使病原菌产生抗性的缺点。近年来,采用生物方法防治果蔬腐烂越来越受到重视,尤其是使用植物挥发性物质或者植物精油来抑菌成为研究热点。植物挥发性物质和精油有着无污染、成本低、效果明显的优点,尤其是柠檬醛、柠檬烯、肉桂醛、己烯醛等已被相关专家、学者通过实验证实其明显的抑菌作用,为防治番茄果腐病提供了广阔的空间。本实验以α-水芹烯及壬醛作为抑菌剂,对圆弧青霉和灰霉进行离体和活体抑菌实验,研究其抑菌效果,为番茄果实的病害防治和果蔬保鲜提供新途径,探寻新方法。在离体实验中,通过抑菌实验大体确定两种抑菌剂对两种真菌的抑菌浓度。通过琼脂稀释培养法研究α-水芹烯及壬醛对圆弧青霉菌丝体生长的影响,且确定α-水芹烯及壬醛的MIC及MFC,通过扫描电镜观察α-水芹烯及壬醛处理真菌后的生长情况,通过比较对照组与处理组的细胞内溶物泄露,细胞外pH,细胞外电导率,细胞外K~+,真菌脂质含量的变化等指标,探讨其抑菌机理;在活体实验中,通过统计果实腐烂率,测定抑菌剂对番茄果实的失水率、硬度、pH、TSS含量等的影响,以及果实内防御抗氧化酶的几种关键酶(SOD、CAT、POD、PAL)活性以及总酚、类黄酮含量变化,研究抑制剂对番茄果实的影响。其主要结果总结如下:离体实验中,α-水芹烯及壬醛对圆弧青霉和灰霉均存在不同浓度的抑制作用,α-水芹烯对圆弧青霉的最小抑菌浓度为170μL/L,最小杀菌浓度为180μL/L;壬醛的最小抑菌浓度为25μL/L,最小杀菌浓度为45μL/L。在对灰霉抑菌实验中,α-水芹烯的最小抑菌浓度为160μL/L,最小杀菌浓度为220μL/L;壬醛的最小抑菌浓度为25μL/L,最小杀菌浓度为50μL/L。由此可知,壬醛抑菌效果要优于α-水芹烯。通过α-水芹烯和壬醛处理圆弧青霉、灰霉,测定其核酸泄漏、胞外电导率、胞外pH、K~+泄漏、脂质含量等变化情况,结果研究表明,圆弧青霉、灰霉经处理,其核酸泄漏增加,胞外电导率上升,胞外pH值下降,K~+泄漏明显加剧,表明抑菌剂造成真菌细胞内溶物大量泄漏,脂质含量明显降低可知真菌细胞膜结构可能发生变化。扫描电镜观察真菌在抑菌剂处理下微观形态发现真菌菌丝体菌柄发生扭曲,甚至出现螺旋状,分子孢子凹陷现象严重,进一步证实了抑菌剂破坏了真菌的细胞膜结构,进而使其通透性增加,细胞内溶物大量外泄,从而抑制了真菌的生长。在活体实验中,以抑菌效果较好的壬醛作为活体抑菌剂。研究结果表明,壬醛浓度越高对番茄青霉、灰霉抑制效果越好,由真菌造成的番茄果实腐烂率也越低。通过测定各处理组果实品质指标,如硬度、Vc含量、TSS含量等,可以发现,壬醛对番茄果实品质无明显影响,但可诱导番茄抗氧化能力提升,使防御抗氧化酶(SOD、CAT、POD、PAL)活性上升,进而诱导酚类物质和类黄酮的产生,提高番茄果实自身对青霉、灰霉的抵抗作用,降低果实的腐烂率。
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