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流苏石斛是一种兰科石斛属多年生草本植物，为《中国药典》（2010版）收录。本文对流苏石斛多糖进行了提取、分离纯化、结构鉴定和免疫活性的研究。干燥的流苏石斛茎粉末脱色脱脂后，通过响应面优化法确定水溶性多糖WDFP的最佳提取条件为：温度82°C，时间51min，液料比33.3:1，在此条件下WDFP的提取得率为9.68%。水溶性多糖提取后的残渣先后进行碱溶液提取和酸溶液提取，获得碱溶性多糖BDFP和酸溶性多糖ADFP。WDFP经DEAE-Cellulose阴离子交换色谱柱分级得到五个组分： WDFP-1、 WDFP-2、WDFP-3、WDFP-4和WDFP-5。经葡聚糖凝胶渗透色谱，从WDFP-1中分离获得3种均一性多糖WDFP-1a、WDFP-1b和WDFP-1c，其相对分子量约为2.4×104Da、1.5×10~4Da、和7.6×10~3Da；从WDFP-4中分离获得1种均一性多糖WDFP-4a，其相对分子量约为2.3×10~6Da；从WDFP-5中分离获得1种均一性多糖WDFP-5a，其相对分子量约为1.9×10~6Da。采用甲基化分析、红外光谱分析、气相色谱分析、气质联用分析、核磁共振波谱分析等方法，对各均一多糖进行了结构鉴定。结果表明：（1）WDFP-1a由葡萄糖和甘露糖构成，摩尔比为2.41:1.00，其主链由1,4-linked β-D-Manp和1,4-linked β-D-Glcp构成，在1,4-linked β-D-Manp的O-2/3位存在乙酰基；（2）WDFP-1b由葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,4-linked Glcp、1,6-linked Manp、1,3,6-linked Manp和1-linked Glcp，其摩尔比约为3.99:2.81:1.08:1.00；（3）WDFP-1c由葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,4-linkedGlcp、1,6-linked Manp、1,3,6-linked Manp和1-linked Glcp，其摩尔比约为4.05:3.19:1.13:1.00；（4）WDFP-4a由半乳糖、葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,6-linked Galp、1,4-linked Glcp、1,3,6-linked Manp和1-linked Glcp，其摩尔比约为9.28:5.41:1.03:1.00；（5）WDFP-5a由半乳糖、葡萄糖和甘露糖构成，糖苷键类型主要有1,6-linked Galp、1,4-linked Glcp、1,3,6-linked Manp、1,3,6-linked Galp和1-linked Glcp，其摩尔比约为15.53:7.71:1.72:1.00:2.63。利用NMR技术，对各均一多糖组分中单糖残基的C、H进行了归属。免疫活性检测结果表明，流苏石斛多糖具有较高的肠道免疫活性，但不同多糖组分之间差异较大，其中WDFP、WDFP-1和WDFP-1b活性较高。