目的:通过观察中药肠康方联用结肠靶向益生菌对IBS-D大鼠的影响,探讨肠康方联用结肠靶向益生菌治疗IBS-D大鼠是否具有协同作用,并探索其机制是否为调节肠道菌群及改善肠黏膜屏障功能。方法:Wistar大鼠采用番泻叶灌胃叠加束缚刺激法造模,将造模成功的大鼠分为肠康方高剂量组、肠康方中剂量组、肠康方低剂量组、结肠靶向益生菌组、肠康方高剂量联用结肠靶向益生菌组、肠康方中剂量联用结肠靶向益生菌组、肠康方低剂量联用结肠靶向益生菌组、模型对照组及空白组9组,每组大鼠10只。给药2周后,计算各组大鼠体重增长率、造模前后2h及给药后2h排便粒数数值,测定大鼠AWR评分,同时采用高通量测序技术检测肠道菌群的变化以及运用免疫组化染色的方法测定ZO-1、TLR-4的表达。结果:(1)与空白组比较,模型组大鼠的体重增长率下降,造模后2h模型组大鼠的排便粒数与空白组相比较明显增多(P<0.01),AWR评分在各压力值下均升高(P<0.01),提示IBS-D大鼠造模成功,成功率为80.95%;(2)给药后各干预组与模型组比较2h排便粒数均有不同程度的减少(P<0.05),其中肠康方高、中、低剂量联用结肠靶向益生菌组排便粒数减少的更加明显(P<0.01)。(3)给药干预后,与空白组大鼠相比,模型组大鼠的shannon指数明显偏低,各治疗组shannon指数较模型组增加,β多样性分析结果显示各治疗组的IBS-D大鼠肠道菌群多样性均趋向于正常组,其中以肠康方联用结肠靶向益生菌组更为显著,给肠康方、结肠靶向益生菌及肠康方联用结肠靶向益生菌均可明显增加大鼠肠道中毛螺菌科菌和瘤胃菌科菌丰度,降低普雷沃氏菌科菌丰度,给肠康方联用结肠靶向益生菌治疗后大鼠肠道中乳杆菌目和梭菌目的细菌占优势;(4)给药干预后,模型组与空白组相比,结肠黏膜组织中ZO-1蛋白表达显著降低,而肠康方低剂量组和结肠靶向益生菌组ZO-1蛋白表达均增加,但增加程度有限(P<0.05),肠康方高、中、低剂量联用结肠靶向益生菌组ZO-1蛋白表达则相对增加明显(P<0.01),其中以肠康方低剂量联用结肠靶向益生菌组尤为显著,具有统计学意义;(5)模型组大鼠肠黏膜的TLR-4的表达高于空白组,给药干预后,各组大鼠肠黏膜的TLR-4的表达均有不同程度的降低,但肠康方高、中剂量组效果与模型组差异较小,无统计学意义(P>0.05),其余组的TLR-4的表达均降低具有统计学意义(P<0.01),其中肠康方高、中、低剂量联用结肠靶向益生菌组下降的幅度更大,而以肠康方低剂量联用结肠靶向益生菌组最为明显。结论:肠康方联用结肠靶向益生菌可更好的改善IBS-D大鼠的腹泻症状,经二药联合治疗后IBS-D大鼠肠道菌群的多样性更加趋于正常组,肠道黏膜Z0-1的表达增加、TLR-4的表达下降。可以推断,肠康方联用结肠靶向益生菌对IBS-D大鼠具有协同治疗作用,其机制可能为调节肠道菌群及改善肠黏膜屏障功能。