【摘 要】
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目的:通过检测一次性大负荷离心运动后大鼠骨骼肌不同时相下线粒体内质网偶联程度的变化、线粒体内钙离子浓度变化以及线粒体内质网偶联（Mitochondria-Associated Endoplasmic reticulum Membrane,MAM）连接蛋白Mfn2、VAPB和PTPIP51表达变化,探究一次性大负荷离心运动造成的骨骼肌超微结构损伤与线粒体内质网偶联变化之间的关系。方法:实验动物选用4
【基金项目】
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国家自然科学基金（31471133）; 北京体育大学自主课题（2019PT013）
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目的:通过检测一次性大负荷离心运动后大鼠骨骼肌不同时相下线粒体内质网偶联程度的变化、线粒体内钙离子浓度变化以及线粒体内质网偶联（Mitochondria-Associated Endoplasmic reticulum Membrane,MAM）连接蛋白Mfn2、VAPB和PTPIP51表达变化,探究一次性大负荷离心运动造成的骨骼肌超微结构损伤与线粒体内质网偶联变化之间的关系。方法:实验动物选用48只8周龄SPF级健康雄性SD大鼠。将48只大鼠随机分为安静对照组（C）和运动干预组（E）。将运动组分为运动后即刻组（E0）,运动后12h组（E12）、运动后24h组（E24）、运动后48h组（E48）和运动后72h组（E72）,每组8只。对运动干预组大鼠进行一次性离心运动干预,训练方案选用Armstrong运动模型,跑台坡度设定为-16°,训练时长为90min。训练结束后,根据实验安排的不同时向对大鼠比目鱼肌进行取材,分别使用透射电子显微镜观察单位面积MAM出现频率的变化,采用免疫荧光双染法检测骨骼肌线粒体外膜标记蛋白TOMM20和内质网钙离子通道蛋白RyR1的共定位程度变化,通过荧光探针法对线粒体内钙离子进行特异性的标记和测定,通过Western Blot方法对MAM连接蛋白Mfn2、VAPB和PTPIP51蛋白表达变化进行测定。对实验所得数据使用SPSS20软件进行ANOVA单因素方差分析,方差齐性时选用LSD方法进行组间多重比较,方差不齐时选用Tamhanes方法。结果:（1）一次性大负荷离心运动后单位面积内（每100μm~2）骨骼肌MAM数量和TOMM20与RyR1的共定位系数在运动后即刻起显著性升高,并且在运动后0h至24h内一直维持较高水平（p<0.05）;（2）一次性大负荷离心运动后线粒体内钙离子浓度显著性升高,最大值出现在运动后12h（p<0.01）随后逐渐降低;（3）一次性大负荷离心运动后Mfn2蛋白表达先升高后降低再升高,各组间无显著性差异（p>0.05）,VAPB和PTPIP51蛋白表达在运动后呈现升高后降低的趋势,最大值出现在运动后24h。结论:（1）一次性大负荷离心运动后线粒体内质网偶联程度增加导致内质网向线粒体内钙离子转运增多;（2）一次性大负荷离心运动后骨骼肌MAM连接蛋白VAPB和PTPIP51蛋白表达增多,VAPB和PTPIP51能够促进线粒体内质网偶联,Mfn2对线粒体内质网偶联的影响不明确。
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