论文部分内容阅读
β2-受体激动剂是一类苯乙胺类药物,起初主要在临床上用于治疗支气管哮喘、痉挛,阻塞性肺炎等症状,后来发现当把较大剂量的此类药物添加到饲料中时,会大大提高动物的瘦肉转化率,具有营养再分配的作用。若长期食用含有β2-受体激动剂残留的食品就会发生头痛,胸闷,恶心等不良反应,因此欧盟和我国先后都颁布法令禁止在畜禽生产中使用该类药物。本研究旨在建立猪肉中β2-受体激动剂残留的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)确证方法和表面等离子生物传感器(SPR-biosensor)的筛选方法。UPLC-MS/MS方法:称取2.0 g匀质的样品经酶解后,用高氯酸:甲醇(9:1,v/v)混合溶液除蛋白后,经混合型的PCX柱净化,氮气吹干后,使用初始的流动相定容到2.0 mL。最后经过超高效液相色谱电喷雾串联质谱检测。结果表明,本方法有效的减少了离子抑制现象,沙丁胺醇,莱克多巴胺,盐酸克伦特罗三种β2-受体激动剂的平均回收率都在85%以上,相对标准偏差(n=3)在2.3-11%范围内,方法检出限在0.07-0.12μg/kg,定量限在0.22-0.38μg/kg。SPR生物传感器方法:样品经高氯酸提取,乙酸乙酯净化后,通过分别固定抗原和抗体优化了SPR检测方法,并对缓冲液,再生溶液进行了优化,建立了猪肉中莱克多巴胺的SPR生物传感器抑制免疫残留检测方法,该方法对莱克多巴胺的检出限为0.6μg/kg,在1、2和4μg/kg三个浓度添加水平下,平均回收率为81%-102%,相对标准偏差均在10%以内。本方法简单快速,检测时间为5.0 min,与ELISA方法比较,抗体无需标记。在相同的前处理条件下,与UPLC-MS/MS相比,虽然检测限较高,但回收率和精密度都较好,并且受样品基质的影响小。特别适合大量样品的快速筛选。与国外方法相比,本研究采用中国科学院自行研制的SPR-2004生物传感器及芯片成本低,抗基质干扰能力强,具有广泛的应用前景。本研究所建立的两种检测猪肉中β2-受体激动剂残留检测方法,样品处理简单,去除基质干扰能力强,回收率、精密度以及方法精密度都较好,UPLC-MS/MS方法,适合样品的确证分析。SPR生物传感器方法,特别适合大量样品的快速筛选工作,而且成本较低,可以用于工厂,超市,集市等场所的质量控制。