【摘 要】
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本研究以葛根为原料,将生物预处理与热醇提工艺相结合,有效提高了葛根素的提取率。实验表明,采用纤维素酶对葛根进行酶解预处理,在单因素实验的基础上,利用响应面曲面法优化
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本研究以葛根为原料,将生物预处理与热醇提工艺相结合,有效提高了葛根素的提取率。实验表明,采用纤维素酶对葛根进行酶解预处理,在单因素实验的基础上,利用响应面曲面法优化酶解工艺条件为:酶解温度为49℃,加酶量为86u/g,初始pH为4.56,酶解时间为151min,醇提后葛根素的提取率达到6.59%;而采用直接热醇提方法的葛根素提取率仅为2.02%。 本文采用黑曲霉菌发酵法对葛根进行预处理,利用微生物产生的复合酶系破坏植物细胞壁,促进有效成分的溶出。利用响应曲面法,以二次回归方程预测模型为基础,对黑曲霉发酵葛根的预处理条件进行了优化。实验表明,曲面回归方程与实验结果拟合性好,优化预处理条件为:接种量为10%,发酵温度为29℃,发酵时间为97h,初始料液比为1:10,醇提后葛根素提取率达到7.03%,是未经预处理的3.48倍。对黑曲霉发酵过程中纤维素酶活力的测定表明,96h左右达到产酶高峰期,酶活力为2263.2U/g干曲。用D101型大孔吸附树脂对葛根素进行精制,分离纯化的最适条件为:上样液浓度13.64mg/mL,上样量不超过4BV,上样时间至少为120min;蒸馏水洗涤杂质后,用3BV60%乙醇洗脱葛根素,流速2mL/min。吸附等温模型能用Freundich模型方程较好的拟合,在40℃下吸附性能最大。静态吸附动力学模型拟合表明,吸附过程由液膜扩散和颗粒内扩散共同控制,且颗粒内扩散为主要控制因素。通过红外光谱和薄层色谱分析,所得产物确为葛根素。用滤纸片法研究葛根素提取液的抑菌活性,结果表明,葛根素的抑菌效果为:大肠杆菌>金黄色葡萄球菌>绿脓杆菌>白色念珠菌。
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