结核病（Tuberculosis,TB）是全球十大死亡原因之一,它是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）引起的一种传染性疾病。接种卡介苗仅对预防儿童脑膜结核有一定作用,针对结核病目前仍然以药物治疗为主。在药物的选择压力下,耐药结核分枝杆菌菌株不断增加,导致―耐多药结核病（Multidrug-resistant Tuberculosis,MDR-TB）‖和―广泛耐药结核病（Extensively drug resistant Tuberculosis,XDR-TB）‖的病例越来越多。因此,必须研究开发新型抗结核药物。天南星别名蛇芋、蛇包谷、虎掌,为天南星科植物天南星、东北天南星或异叶天南星等的块茎,具有祛风止痉、散结消肿、燥湿化痰的功效,民间用于治疗淋巴结核。本研究的目的是从天南星中跟踪分离出具有抗结核杆菌活性的分子,并初步探讨活性分子抗结核杆菌的作用机制。采用活性跟踪分离法,从天南星中跟踪分离得到具有抗结核杆菌活性的化合物SF,根据波谱数据结合文献,该化合物被鉴定为水飞蓟宾。采用刃天青显色法,测得水飞蓟宾抑制结核杆菌的MIC值为160μg/ml,采用菌落计数测得其MBC值亦为160μg/ml。采用棋盘试验,发现水飞蓟宾与吡嗪酰胺和异烟肼存在联合抗菌作用,表现为相加效应和协同效应,与利福平无拮抗作用。此外,水飞蓟宾对结核杆菌生物膜具有抑制作用。结核杆菌经水飞蓟宾处理后,在光学显微镜下,可见结核杆菌菌体变长,我们判断,水飞蓟宾的抗菌作用可能与抑制结核杆菌分裂有关。首先,进行虚拟分子对接,结果显示,水飞蓟宾与结核杆菌的Fts Z蛋白和SSD蛋白具有较强的亲和力。然后采用荧光定量PCR技术,测定结核杆菌被水飞蓟宾处理后ssd基因的相对转录水平,结果表明,水飞蓟宾浓度为80μg/ml时,ssd基因转录下调,水飞蓟宾浓度为160μg/ml时,ssd基因转录上调。SSD蛋白是决定结核杆菌分裂时隔膜形成的关键调控蛋白,SSD蛋白表达增加,将导致结核杆菌分裂时的隔膜缺失,使菌体变长,提示水飞蓟宾对结核杆菌分裂产生了干预。最后采用扫描电镜观察,发现低浓度的水飞蓟宾使结核分枝杆菌变得细长,局部膨胀,加大水飞蓟宾的浓度后,结核杆菌变成球形,直至崩解。我们推测,水飞蓟宾阻断了结核杆菌分裂时隔膜的形成,成为2倍体细胞,对营养的需求加大,而结核杆菌独特的细胞壁结构对更多的营养物质进入细胞起限制作用,导致代谢调控发生紊乱,细胞壁的分枝菌酸层变薄,大量水分子进入高渗透压的细胞内,最终导致细胞膨胀、破裂。综上所述,水飞蓟宾与一线抗结核药物具有良好的相容性,具有较为独特的抗菌机制,在设计新的抗结核组合用药方案时,可以考虑加入水飞蓟宾。本研究为使用天南星治疗结核病提供了体外试验基础,为研发具有新作用机制的抗结核杆菌药物提供了新思路。