目的:探讨syk在人乳腺癌细胞中的表达变化,研究As₂O₃诱导乳腺癌细胞凋亡、对乳腺癌细胞侵袭性和粘附性影响与syk表达的相关性。方法:1用RT-PCR、Western blot、流式细胞技术分别检测MDA-MB-468和MDA-MB-231两种人乳腺癌细胞株Syk、MMP-9和ICAM-1的表达。2采用MTT法分析As₂O₃对MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞增殖反应的抑制作用。3用不同浓度As₂O₃分别处理MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞后,采用Gimsa染色技术、流式细胞技术检测细胞凋亡情况;用半定量RT-PCR法、流式细胞技术分别从mRNA水平和蛋白水平研究As₂O₃诱导细胞凋亡前后细胞Syk、MMP-9和ICAM-1表达的变化,分析As₂O₃诱导细胞凋亡及影响其侵袭性和粘附性的可能机制。4 As₂O₃体内抑瘤作用的实验研究采用右腋皮下接种法,分别接种MDA-MB-468（syk+）和MDA-MB-231（syk-）细胞建立荷瘤裸鼠动物模型,通过尾静脉注射As₂O₃,连续注射七天,观察As₂O₃对荷瘤小鼠肿瘤形成以及小鼠生存期的影响。5收集各组裸鼠的肿瘤组织,用4%多聚甲醛固定后,进行免疫组化、HE染色,显微镜下观察组织病理学变化。6用流式细胞技术检测各组裸鼠肿瘤细胞的凋亡情况及Syk、MMP-9和ICAM-1蛋白表达变化。结果:1 MDA-MB-468细胞Syk表达阳性,而MDA-MB-231细胞Syk表达阴性。MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞均表达MMP-9和ICAM-1,但MMP-9在MDA-MB-231细胞中表达水平强于MDA-MB-468细胞;而ICAM-1在MDA-MB-231细胞中的表达水平弱于MDA-MB-468细胞。2体外实验结果显示,As₂O₃可显著抑制MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞的增殖,且抑制效应与As₂O₃呈剂量和作用时间依赖性（P<0.01）。其中As₂O₃对MDA-MB-231细胞的抑制作用强于对MDA-MB-468细胞的抑制作用。3 As₂O₃作用于MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞后,可诱导较典型的细胞凋亡形态学变化,如细胞胞体缩小,胞质浓缩,胞核向外呈锐角突起,染色质高度浓缩,电子密度增高,边集于核膜下或呈新月形,有的出现核固缩,核碎裂等;经流式细胞术分析,4μg/ml As₂O₃处理48h,诱导MDA-MB-468细胞的凋亡率可达5.80%,而未处理组细胞凋亡率只有2.03%;诱导MDA-MB-231细胞的凋亡率可达9.32%,未处理组细胞凋亡率只有1.41%;在As₂O₃作用下,MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞周期也发生了改变,G2/M期和S期细胞明显增多,G0/G1期细胞比率显著下降,细胞周期被阻滞在S+G2/M期。4不同浓度的As₂O₃处理MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞前后,RT-PCR和流式细胞技术检测结果显示,两种细胞的MMP-9基因表达受抑,而ICAM-1基因的表达上调。MDA-MB-231细胞Syk基因表达仍阴性,但MDA-MB-468细胞Syk基因表达上调。5体内实验结果显示,As₂O₃具有明显的抑瘤作用,流式细胞检测结果显示,用As₂O₃治疗后肿瘤组织细胞发生了凋亡现象,用药后接种MDA-MB-231（syk-）细胞,荷瘤裸鼠的肿瘤组织细胞凋亡率达49.04%,而其对照组的凋亡率是9.41%;接种MDA-MB-468（syk+）细胞荷瘤裸鼠的肿瘤组织中,细胞的凋亡率为37.85%,其对照组的凋亡率是12.34%。6免疫组化及流式细胞技术检测结果显示,经As₂O₃治疗的荷瘤裸鼠组织中,ICAM-1标记指数比阴性对照组高,且接种MDA-MB-468（syk+）细胞荷瘤裸鼠的肿瘤组织,ICAM-1的表达水平高于接种MDA-MB-231（syk-）细胞的裸鼠肿瘤组织;经As₂O₃治疗的荷瘤裸鼠组织MMP-9标记指数比阴性对照组低,接种MDA-MB-468（syk+）细胞荷瘤裸鼠的肿瘤组织MMP-9的表达低于接种MDA-MB-231（syk-）细胞的裸鼠肿瘤组织,且差异均有显著性。Syk在瘤组织中表达阴性。结论:1 As₂O₃体外和体内均具有很强的抗肿瘤作用。2 Syk在恶性程度低的乳腺癌细胞株MDA-MB-468中表达阳性,在恶性程度高的乳腺癌细胞株MDA-MB-231中表达阴性。3 As₂O₃可降低乳腺癌细胞的侵袭性、增加其粘附性,经As₂O₃作用后,乳腺癌细胞的Syk表达增加。提示As₂O₃诱导乳腺癌细胞凋亡及影响其侵袭性和粘附性的机制可能与Syk表达增加有关。