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目的:本研究通过建立异烟肼-利福平（INH-RFP）、雷公藤多苷（TPGS）、对乙酰氨基酚（APAP）诱导的三种药源性肝损伤小鼠模型,研究藏药二十五味松石丸对小鼠药源性肝损伤的改善作用,并基于Keap1/Nrf2与TLR4/NF-κB p65信号通路研究二十五味松石丸改善药源性肝损伤的作用机制。方法:1.将48只昆明小鼠随机分为空白组、INH-RFP模型组、二十五味松石丸高(400 mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、低(100 mg·kg-1)剂量组及阳性药水飞蓟素（silymarin,SLM）组。各给药组小鼠均连续灌胃给药14 d。除空白组外,其余各组小鼠自给药第一天起以INH、RFP分别为150 mg·kg-1、50 mg·kg-1的剂量联合灌胃14 d造模。最后一次造模12 h后收集小鼠血清与肝脏组织,通过肝脏病理切片苏木精-伊红染色（HE）,并检测小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平以及肝匀浆中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、总抗氧化能力（T-AOC）水平,观察与分析二十五味松石丸对INH-RFP致小鼠肝损伤的保护作用。2.将48只昆明小鼠随机分为空白组、TPGS模型组、二十五味松石丸高(400mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、低(100 mg·kg-1)剂量组及阳性药水飞蓟素（SLM）组。各给药组小鼠均连续灌胃给药14 d。除空白组外,其余各组小鼠自给药第一天起以TPGS 300 mg·kg-1的剂量连续灌胃14 d。最后一次造模12 h后收集小鼠血清与肝脏组织,通过肝脏病理切片苏木精-伊红染色（HE）,并检测小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平以及肝组织匀浆中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、总抗氧化能力（T-AOC）水平,观察与分析二十五味松石丸对TPGS致小鼠肝损伤的改善作用。3.将48只昆明小鼠随机分为空白组、APAP模型组、二十五味松石丸高(400mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、低(100 mg·kg-1)剂量组和乙酰半胱氨酸（NAC）组。各给药组小鼠均连续给药14 d后,除空白组外,其余各组小鼠腹腔注射200mg·kg-1 APAP,12 h后收集小鼠血清与肝脏组织。通过肝脏病理切片苏木精-伊红染色（HE）,并检测小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平以及肝组织匀浆中谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）及髓过氧化物酶（MPO）水平,观察与分析二十五味松石丸对APAP致小鼠药源性肝损伤的改善作用。免疫组化法（IHC）检测小鼠肝脏半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）蛋白表达水平。ELISA法测定小鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）与白介素6（IL-6）水平,Western blot法测定小鼠肝细胞核内核转录因子E2相关因子2（Nrf2）、细胞质Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）、肝脏内toll样受体4（TLR4）以及细胞核内核因子κB p65（NF-κB p65）蛋白表达,实时荧光定量PCR测定小鼠肝脏中谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基（GCLM）、血红素氧合酶1（HO-1）、还原型辅酶/醌氧化还原酶1（NQO-1）基因m RNA相对表达水平,初步探究二十五味松石丸改善小鼠药源性肝损伤的作用机制。结果:1.与INH-RFP模型组比较,二十五味松石丸给药组小鼠肝脏病理损伤程度有所改善;肝脏系数有降低趋势,但无显著性差异;高剂量组小鼠血清AST水平以及中剂量组小鼠血清ALT水平有所降低;各给药组小鼠肝脏MDA水平有降低趋势,但无显著性差异;中剂量组小鼠肝脏SOD水平以及高剂量组小鼠肝脏GSH、T-AOC水平有所升高。2.与TPGS模型组比较,二十五味松石丸各给药组小鼠肝脏病理损伤程度有减轻的趋势。高剂量组小鼠肝脏系数有所降低,其它给药组小鼠肝脏系数有降低趋势,但无显著性差异;中剂量组小鼠血清AST水平以及各给药组小鼠血清ALT水平有所降低;中剂量组小鼠肝脏中MDA水平有所降低,其它给药组小鼠肝脏中MDA水平有降低趋势,但无显著性差异;低剂量组小鼠肝脏中SOD水平以及中剂量组小鼠肝脏T-AOC水平有所升高。3.与APAP模型组相比,二十五味松石丸给药组小鼠肝脏病理损伤程度有所改善;肝脏系数及血清AST、ALT水平有所降低;肝脏中GSH、SOD、CAT、T-AOC水平有所升高,MDA、MPO有所降低;caspase-3表达无显著性差异;血清TNF-α、IL-6水平有所降低;小鼠肝脏细胞质Keap1、细胞核NF-κB p65表达有所减少,细胞核Nrf2表达有所增加,肝脏TLR4表达无显著性差异;GCLC、GCLM、HO-1、NQO-1等抗氧化基因m RNA相对表达量也有所增加。结论:研究结果表明,藏药二十五味松石丸可改善INH-RFP、TPGS、APAP三种药物诱导的药源性肝损伤氧化损伤与炎症反应,其作用机制可能与调节Keap1/Nrf2信号通路以及TLR4/NF-κB p65通路上的信号转导因子有关。